Diagnoza serologjike e infeksionit sifilitik. Metodat dhe algoritmet moderne laboratorike për diagnostikimin e sifilizit. Si të interpretoni testet e sifilisit

Taksonomia e Borrelia, Leptospira dhe Treponema, dhe emrat e sëmundjeve të shkaktuara prej tyre.

Familja: Spirochaetaceae

Gjinia: Borrelia

Llojet: B. recurrentis - agjenti shkaktar i etheve epidemike recidive.

Gjinia: Treponema

Llojet: T. pallidum - agjenti shkaktar i sifilisit

Gjinia: Leptospira

Lloji: L. Icterohaemorrhagiae - agjenti shkaktar i leptospirozës

Diagnoza mikroskopike e sifilizit.

Mikroskopi me fushë të errët: para studimit, lëngu i indeve merret nga fundi i ulçerës ose pika e nyjës limfatike. Përgatitet një përgatitje e një pike të grimcuar: një pikë e materialit të provës aplikohet në mes të rrëshqitjes së qelqit, pika mbulohet me një rrëshqitje mbuluese në mënyrë që të mos ketë flluska ajri. Rezultati pozitiv: në mikroskop gjenden treponema me kaçurrela uniforme 8-12 të mëdha. Karakterizohen nga lëvizje të lëmuara rrotulluese-përkthyese, lavjerrësore dhe përkulëse.Kur ngjyrosen sipas Romanovsky-Giemsa: shkaktari i sifilisit merr ngjyrë rozë të zbehtë, treponema të tjera marrin ngjyrë të kuqërremtë-vjollcë.

Reaksionet e përdorura në serodiagnozën e sifilizit. Karakteristikat e përgjithshme të secilit prej tyre.

RSK(Reagimi Wasserman): Komponentët: 1 sistem - serumi i pacientit, diagnosticum, komplementi, CNI; Sistemi 2 - serum hemolitik dhe një pezullim i eritrociteve të deleve. Përgatitet 1 sistem, inkubohet në 37C për 1 orë.Shtohet një sistem i dytë, inkubohet në 37C për 1 orë.Rezultat pozitiv është mungesa e hemolizës.

RPGA: Përbërësit: CNI, serumi i pacientit, diagnostikimi i eritrociteve. Përgatiten hollime serumi, shtohet diagnosticum, në një termostat për 24 orë 37C. Kati. rezultat: ombrellë.

ELISA: Përbërësit: serumi i pacientit, diagnostikimi, konjugati, substrati kromogjen. Diagnosticum lidhet me plastikën e pusit të tabletës, shtohet serumi i holluar, konjugati dhe substrati. Kati. rezultat: një ndryshim në ngjyrën e nënshtresës.

RIF indirekte: AG aplikohet në një rrëshqitje xhami - treponema e zbehtë (sforcim Nichols). Njollat ​​thahen në ajër dhe fiksohen në aceton për 5 minuta. Serumi i pacientit zbrazet me një suspension të treponemave jopatogjene të shtamit Reiter ose hollohet 1:200, pastaj aplikohet në preparatet e përgatitura. Mbajeni në dhomë të lagësht në 35C për 30 minuta (1 fazë). Njollat ​​lahen për 10 minuta në ICN dhe thahen. Më pas, një pikë serumi fluoreshent kundër globulinës njerëzore aplikohet në preparat dhe inkubohet në një dhomë të lagësht në temperaturën e dhomës për 30 minuta (faza 2). Smeat lahen me ICN dhe thahen. parë nën një mikroskop fluoreshent. Reagimi pozitiv: shkëlqim jeshil.

Reagimi i flokulimit në xhami: Plazma e gjakut ose serumi i panxehur përzihet me një antigjen lipid jo-specifik për disa minuta në një rrëshqitje xhami. Rezultati pozitiv: grimcat e zgjeruara të antigjenit (flokulat) janë të dukshme nën zmadhim të ulët.

Serodiagnoza e sifilisit duke përdorur RPHA.

Përbërësit: CNI, serumi i pacientit, diagnostikimi i eritrociteve. Përgatiten hollime serumi, shtohet diagnosticum, në një termostat për 24 orë 37C. Kati. rezultat: ombrellë.

Serodiagnoza e sifilizit duke përdorur ELISA.

Përbërësit: serumi i pacientit, diagnostikimi, konjugati, substrati kromogjen. Diagnosticum lidhet me plastikën e pusit të tabletës, shtohet serumi i holluar, konjugati dhe substrati. Kati. rezultat: një ndryshim në ngjyrën e nënshtresës.

Serodiagnoza e sifilizit duke përdorur RSK.

Reagimi i Wasserman: mund të përdorni serumin e gjakut dhe lëngun cerebrospinal të pacientit (në fazën e neurosifilisit). Si një diagnozë - antigjen treponemal ose kardiolipin. Komponentët: 1 sistem - serumi i pacientit, diagnosticum, komplementi, CNI; Sistemi 2 - serum hemolitik dhe një pezullim i eritrociteve të deleve. Përgatitet 1 sistem, inkubohet në 37C për 1 orë.Shtohet një sistem i dytë, inkubohet në 37C për 1 orë.Rezultat pozitiv është mungesa e hemolizës.

Metodat e diagnostikimit mikrobiologjik të leptospirozës.

Metoda bakterioskopike: përgatitni një përgatitje të një pike të grimcuar, studiojeni atë në një mikroskop me fushë të errët: fije të holla të lëvizshme me kthesa në skajet (kaçurrelat dytësore) - në formën e një kllapa ose shkronja S.

Metoda bakteriologjike: materiali - gjaku, urina, lëngu cerebrospinal. Materiali inokulohet (3-5 epruveta) në një mjedis ujë-serum, medium Fletcher, Patate. Inkubohet deri në 30 ditë në 28-30C në një atmosferë me CO 2 . Për të zbuluar rritjen e leptospirës, ​​10 ditë pas inokulimit, merret materiali nga epruveta, përgatitet një preparat me kalium të grimcuar dhe studiohet nën një mikroskop me fushë të errët. Nga epruveta ku është konstatuar rritja e leptospirës, ​​ato nënkulturohen në 3 epruveta me lëndë ushqyese të freskët, të inkubuara për 7-10 ditë, temperatura është e njëjtë. Për diferencim, kryhet një test bikarbonat, përcaktohet aktiviteti hemolitik, aktiviteti i fosfolipazës. Identifikohet nga struktura antigjenike duke përdorur serumet aglutinuese.

kërkime biologjike: Derrat gini injektohen në mënyrë intraperitoneale me 1 g të materialit testues dhe vëzhgohen për një muaj, duke vënë në dukje temperaturën dhe peshën trupore, shfaqjen e verdhëzës dhe hemorragjive, si dhe ngordhjen e kafshës.

Studim serologjik: AT në serum shfaqen nga 2 javë. Përdorni reaksionin e mikroaglutinimit dhe lizës së leptospirës. Serumi i pacientit hollohet dy herë nga 1:100 deri në 1:1600. 0,2 ml serum të holluar dhe e njëjta sasi e një kulture të gjallë të shtameve Leptospira i shtohen një numri epruvetash. Inkuboni për 1 orë në 37C. Nga përmbajtja e secilës epruvetë përgatitet një preparat me pika të grimcuara dhe mikroskopi. Antitrupat në serumin e hollimeve të para shkaktojnë lizë - tretje ose ënjtje kokrrizore të leptospirës. Në hollimet e mëvonshme - aglutinimi - aglomerohet në formën e merimangave. Vlera diagnostike ka një reagim pozitiv në një hollim prej 1:400 dhe më lart.

  1. Potekaev N.N., Frigo N.V., Almazova A.A., Lebedeva G.A. Epidemiologjia e sifilizit në kushtet moderne. Klinike dermatologji dhe venerologji. 2015;1:22-34.
  2. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH. Diagnoza laboratorike dhe interpretimi i testeve për sifilizin. Clin Microbiol Rev 1995 janar; 1-21.
  3. Coles AC. Spirochaeta pallida. Metodat e ekzaminimit dhe zbulimit, veçanërisht me anë të ndriçimit të tokës së errët. Br Med 1909;1:1117-1120.
  4. Kellogg, DSJr, Mothershed SM. Zbulimi imunofluoreshent i Treponema e zbehtë: një rishikim. JAMA 1969;107:938-941.
  5. Mullis KB. Sinteza specifike e ADN-së in vitro nëpërmjet një reaksioni zinxhir të katalizuar nga polimeraza. Meth Enzymol. 1987;155:335.
  6. Centurion-Lara A. Zbulimi i Treponema pallidum nga një PCR e ndjeshme e transkriptazës së kundërt. J Clin Microbiol. 1997;35;6:1348-1352.
  7. Wassermann A, Neisser A, Brück C. Eine serodiagnostische Reaktion bei Sifilis. Dtsch Med Wochenschr. 1906;32:745-746.
  8. Pangborn MC. Kardiolipina dhe aplikimi i saj në një antigjen të pastruar kimikisht për serodiagnozën e sifilisit. Proc N Y Shtetëror Assoc Laboratori i Shëndetit Publik. 1946;26(1):26-29.
  9. Pangborn MC. Një studim i përbërjes së kardiolipinës. FedProc. 1946; 5 (1 Pt 2): 149.
  10. Dmitriev G.A., Bragina E.E. Metodat moderne të diagnostikimit laboratorik të sifilizit. Pjesa I Buletini i dermatologjisë. 1996;2:29-33.
  11. Dmitriev G.A., Bragina E.E. Metodat moderne të diagnostikimit laboratorik të sifilizit. Pjesa II. Buletini i dermatologjisë. 1996;3:33-38.
  12. Rezultate jo specifike pozitive të testeve serologjike për sifilizin. Modifikimet sasiore të testeve serologjike moderne. Udhëzimet. M. 1990.
  13. Urdhri i Ministrisë së Shëndetësisë Nr. 87 i Federatës Ruse i datës 26 mars 2001 "Për përmirësimin e diagnozës serologjike të sifilizit".
  14. Shoqata Ruse e Dermatovenerologëve. Udhëzimet klinike federale për menaxhimin e pacientëve me sifiliz. M. 2013.
  15. Lyakhov V.F., Borisenko K.K., Potekaev N.S., et al. Dinamika e imunoglobulinemisë specifike për treponemën në format e hershme të sifilizit. Buletini i dermatologjisë. 1990;8:38-42.
  16. Kiseleva G.A., Tkachev V.K., Bednova V.N., et al.. Studim krahasues i ndjeshmërisë dhe specifikës së tre imuno-anzave enzimë të dizajnuara për të zbuluar imunoglobulinat e klasës M ndaj agjentit shkaktar të sifilisit. Buletini i dermatologjisë. 2000;4:6-10.
  17. Ermatova F.A. Përcaktimi i imunoglobulinave specifike të klasës M për diagnostikimin e hershëm të sifilizit (studim klinik dhe laboratorik): Dis. … sinqertë. mjaltë. shkencat. M. 2014.
  18. Mardanly S.G., Arsenyeva V.A., Aniskova I.N., Zhigalenko A.R. Sistemi i testimit vendas "Line-Blot Syphilis-IgM" për zbulimin e antitrupave IgM ndaj Treponema pallidum me anë të imunobllotimit linear Dermatologjia klinike dhe venerologjia. 2013;5:35-38.
  19. Guseva S.N. Përdorimi i testit IgM-RIFabs në ekzaminimin e grave shtatzëna për aktivitetin e infeksionit sifilitik. Revista ruse e lëkurës dhe sëmundjeve veneriane. 2004;6:60-63.
  20. Ovchinnikov N.M., Bednova V.N., Delektorsky V.V. Diagnoza laboratorike e sëmundjeve seksualisht të transmetueshme. M. 1987.
  21. Lee K, Park H, Roh EY, Shin S, Park KU, Park MH, Song EY. Karakterizimi i serumeve me rezultate të papajtueshme nga shqyrtimi i sekuencës së kundërt për sifilizin. Biomed Res Int. 2013;2013:269-347.
  22. Binnicker MJ. Cili algoritëm duhet përdorur për të kontrolluar sifilizin? Curr Opin Infect Dis. 2012 shkurt; 25 (1): 79-85.
  23. Castro A, Jost H, Cox D, Fakile Y, Kikkert S, Tun Y, Zaidi A, Park M. Një krahasim i nivelit analitik të marrëveshjes së nëntë analizave treponemale për sifilizin dhe implikimet e mundshme për algoritmin e shqyrtimit. BMJ Hapur. 2013 shtator 19; 3 (9).
  24. Park IU, Chow JM, Bolan G, Stanley M, Shieh J, Schapiro JM. Ekzaminimi për sifilizin me imuno-analizimin treponemal: analiza e rezultateve të serologjisë të papajtueshme dhe implikimet për menaxhimin klinik. J Infekto Dis. 2011 nëntor; 204 (9): 1297-1304.

Universiteti Kombëtar i Kërkimit Mjekësor Rus. N.I. Pirogova

Departamenti i Dermatovenerologjisë, Fakulteti i Pediatrisë

Raport me temën: Metodat laboratorike për diagnostikimin e sifilizit

Plotësohet nga: Nxënësi 440 në grupe

Fakulteti i Pediatrisë

Seranov Igor Anatolievich

    Studime jo-treponemike

    Studimet e treponemisë

    Kompleks për kryerjen e reaksioneve serologjike

    Reagimi i Wasserman

    Reagimi i imunofluoreshencës

    reagimi imunitar i ngjitjes

    Reaksioni i imobilizimit të Treponema zbehtë

    Reaksioni i imunofluoreshencës së adsorbimit të Treponema pallidum

    Reaksioni i hemaglutinimit

    Analiza imunosorbente e lidhur

    reaksioni zinxhir i polimerazës

Të gjitha metodat e hulumtimit serologjik që përdoren sot ndahen me kusht në dy lloje: jo treponemale, kualifikuese (NTT) - dhe treponemal, të cilat vërtetojnë praninë e patogjenit (TT).Sifilizi është shumë i vështirë, klinika është shumë e turbullt dhe jo gjithmonë manifestohet, prandaj përdoren disa analiza serologjike njëherësh për të vendosur diagnozën e saktë. Me konfirmim vizual të pranisë së treponemës së zbehtë në materialin e marrë (duke përdorur mikroskop), diagnoza vendoset menjëherë dhe teste të tjera kryhen rrallë.

Studime jo-treponemike(testet) - NTT janë të ashtuquajturat studime depistimi, ato nuk janë shumë të shtrenjta dhe me ndihmën e tyre mund të ekzaminoni një numër mjaft të madh pacientësh, për më tepër, rezultatet e shumë testeve janë gati shumë shpejt. Por me një rrjedhë të rreme të sëmundjes, me ndjeshmëri të ulët, teste të tilla janë jopraktike dhe nuk mund të arrihet një rezultat 100%.

Gjatë kryerjes jo treponemale testet në materialin që ekzaminohet, zbulohen antitrupa që reagojnë me cardiolipin - antigjen lecithin. Një nga testet e para ishte një metodë e bazuar në reaksionin imunologjik Bordet-Jangu, ku ekstrakti i mëlçisë i një fëmije të porsalindur që vdiq nga sifilizi vepronte si një antigjen. Sot, kur kryhen teste të tilla, antigjeni është lecitinë, kolesterol dhe kardiolipinë.

Jashtë vendit, veçanërisht në SHBA, përdoren 4 metoda jo-treponemale, të cilat ndahen në dy lloje: metoda që ju lejojnë të përcaktoni vizualisht rezultatet e reagimit (RPR dhe TRUST) dhe metodat për leximin mikroskopik të rezultateve (USR dhe VDRL).

Metodat e diagnostikimit jo-treponemal përfshijnë indirekte analiza imunosorbente e lidhur duke përdorur kardiolipinën si antigjen. Në vendin tonë dhe në vendet e CIS, reagimi i plazmës me serumi i inaktivizuar (MR) dhe reagimi me të cilin shoqërohet komplimenti kardiolipinë (RCC).

Të gjitha metodat e diagnostikimit jo-treponemal janë shumë të ngjashme me njëra-tjetrën. Të gjitha kanë një kosto të ulët, janë të thjeshta dhe të shpejta për t'u realizuar. Këto lloj analizash nuk janë të përshtatshme për zbulimin e sëmundjes në fazën parësore dhe për sifilizin që shfaqet fshehurazi (forma latente e sifilizit). Antitrupat që përcaktohen nga një test jo-treponemal shfaqen rreth një muaj pas infektimit me treponemë. Në shumicën e rasteve, në pacientët që janë trajtuar për fazën parësore të sifilizit, testet jo-treponemale janë negative për rreth një vit.

Studimet e treponemisë(testet) - TT-të janë shumë më të shtrenjta, teknika është shumë komplekse dhe ato përdoren për të konfirmuar rezultatet pozitive që janë marrë në studimet jo-treponemale.

Siç thamë më lart metodat treponemale përdoret për të konfirmuar praninë e treponemës së zbehtë në trup, e cila u zbulua duke përdorur teste jo-treponemale. Ato kryhen edhe nëse analizat e kryera nuk kanë dhënë rezultat pozitiv, por klinika sugjeron praninë e një sëmundjeje. Pas shërimit të plotë të sifilizit, më shumë se 80% e të shëruarve kanë një reagim pozitiv kur kryejnë teste treponemale për disa vite të tjera, dhe për disa - për jetën. Bazuar në këtë, testet treponemale nuk përdoren për ekzaminime parandaluese te njerëzit që kanë përfunduar një kurs të plotë trajtimi.

Kërkimet shkencore në fushën e imunologjisë dhe biologjisë molekulare vazhdojnë vazhdimisht dhe me ndihmën e teknologjive më të fundit po shfaqen gjithnjë e më shumë teste të reja për diagnozën e sifilizit, të cilat janë fort në krye. Një nga këto teste, i cili është vendosur në mënyrë të vendosur në praktikë - analiza e imunitetit enzimë (ELISA), dhe shumë metoda kërkimore janë në zhvillim e sipër.

Se kompleksi i testimit serologjik, e cila kryhet në Rusi, përfshin një sjellje gjithëpërfshirëse të reaksioneve serologjike:

reaksionet standarde serologjike -

    reaksioni i fiksimit të komplementit (reaksioni Wassermann),

    reaksion me antigjenin treponemal dhe reaksion me kardiolipinë;

reaksionet e grupit treponemale -

    reaksioni i imunofluoreshencës (RIF)

    reaksioni i ngjitjes imune (RIP);

Reaksionet treponemale të proteinave specifike për specie -

    reaksioni i imobilizimit të treponemit (RIT),

    RIF - abs dhe variantet e tij (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

    reaksioni i hemaglucinimit pasiv të treponemeve (TPHA).

Nëse testet serologjike përdoren të kombinuara, kjo do të bëjë të mundur identifikimin e sëmundjes në fazat e hershme të sëmundjes.

Reaksioni Wasserman është një metodë e fiksimit të komplementit. Për të kryer reaksionin, si antigjen përdoren ekstrakte, të cilat bëhen nga treponema të zbehta (antigjene specifike) dhe kardiolipina është një ekstrakt i përgatitur nga muskuli i zemrës së një demi (antigjene jo specifike). Sa më shumë treponema të zbehta të vërehen në materialin e testimit, aq më e madhe është shkalla e sëmundjes dhe vlerësohet shkalla me pluse:

1) - negative; 2) + i dyshimtë; 3) ++ dobët pozitiv; 4) +++ pozitive; 5) ++++ fort pozitiv.

Reagimi Wasserman (reagimi i fiksimit të komplementit) pa dështuar, ato kryhen së bashku me reaksionet sedimentare - Sachs - Vitebsky dhe Kahn. Natyra imunologjike e reaksioneve në përgjithësi është e njëjtë me atë të reaksionit Wasserman, por këto reaksione kërkojnë më shumë antigjene të ngopura, të cilat, kur reagojnë me reaginat e serumit, japin një precipitim më të madh. Sifilizi primar seronegativ diagnostikohet nëse testet standarde serologjike janë negative. Zbulimi i sifilizit Reagimi Wasserman është efektiv në sifilizin sekondar seropozitiv, këtu rezultatet e testit janë 100% të sakta. Në fazën terciare të sifilisit aktiv, rezultatet janë të sakta në më shumë se gjysmën e pacientëve, dhe në fazat e fundit të sifilizit, me dëmtime të organeve dhe sistemeve të brendshme, rezultatet janë të sakta në gjysmën e pacientëve. Në pacientët me sifiliz të hershëm kongjenital, testet serologjike japin rezultat pozitiv pothuajse gjithmonë, dhe në pacientët me sifiliz kongjenital të vonë - në pothuajse 80% të rasteve.

Parimi i RSK është që reaginat që gjenden në serumin e gjakut të pacientëve me sifilis kanë aftësinë të hyjnë në komponime me antigjene të ndryshme. Komplekset që rezultojnë renditin komplementin e futur në reaksion. Një sistem hemolitik (një përzierje e eritrociteve të dashit me serumin hemolitik) përdoret për të treguar kompleksin reagin-antigjen-komplement. Në prani të kompleksit, eritrocitet precipitojnë. E cila vihet re me sy të lirë. Ashpërsia e hemolizës tregohet nga mjeku me çelësat: pozitivisht 4+, pozitiv 3+, dobët pozitiv 2+ ose 1+ dhe negativ. Krahas vlerësimit cilësor të këtyre reaksioneve, ekziston edhe ai sasior, i cili është i rëndësishëm në diagnostikimin e fazave të caktuara të sifilizit dhe në monitorimin e efektivitetit të terapisë.

Reagimi i imunofluoreshencës (RIF) Ai bazohet në zbulimin e antitrupave që janë etiketuar me një zgjidhje të veçantë fluoreshente për të zbuluar antitrupat që lidhen me antigjenin në rrezet vjollce të një llambë kuarci. Ky reagim është shumë i ndjeshëm dhe ndihmon në identifikimin e sëmundjes në fazën parësore të sifilisit seronegativ. Është edhe ky test që ndihmon në identifikimin e sëmundjes tek pacientët tek të cilët sëmundja është latente ose në fazat e vona. Ka disa lloje të reagimeve të tilla, dhe RIF-200 është më i vlerësuari, me të cilin mund të zbuloni sifilizin latent dhe të njihni rezultatet jo specifike të CSR. Por, megjithë normat e larta të RIF-200, diagnoza vendoset pasi të jenë kryer të gjitha testet klinike. RIF nuk është i përshtatshëm për monitorimin e pacientëve pas trajtimit të plotë, pasi është mjaft ngadalë negativ në fazën e trajtimit.

Reagimi imunitar i ngjitjes (RIP). Ky reagim bazohet në ngjitjen e treponemave të sensibilizuara nga serumi ndaj eritrociteve dhe precipitimit të tyre. Rezultatet vlerësohen sipas tabelës së mëposhtme:

Negative - 0-20%

Të dyshimtë-21-30%;

Dobët pozitive - 31-50%;

Pozitiv-51-100%.

Në të gjitha aspektet, RIP është shumë i ngjashëm me RIF dhe RIT. Ky reagim kryhet në disa raste, nëse sifilizi nuk konfirmohet në bazë të manifestimeve klinike, anamnezës, analizave laboratorike, për të kontrolluar sëmundjen pas marrjes së trajtimit të nevojshëm dhe për të konfirmuar rezultatet e CSR.

Reaksioni i imobilizimit të treponema zbehtë (RIT) Pasi në një mjedis ku ka imobilizina të serumit testues dhe komplement aktiv, treponema e zbehtë humbet lëvizshmërinë e tyre. Kjo është baza e këtij reagimi. RIT është shumë specifik dhe përdoret për të zbuluar sifilizin latent, për të diagnostikuar gratë shtatzëna në të cilat dyshohet për sifiliz dhe shumë raste të tjera në të cilat testet serologjike standarde kanë pak specifikë. Disavantazhi i madh i këtij reagimi është se është shumë i shtrenjtë dhe është një proces shumë i ndërlikuar për t'u kryer. Rezultatet lexohen sipas të dhënave të përqindjes së imobilizimit të treponemave të zbehtë:

Negativ - deri në 20%; -të dyshimta -21-30%; -dobët pozitiv -31-50%; -pozitive -51-100%.

Për shkak të faktit se imobilizinat shfaqen në gjak më vonë se antitrupat e tjerë, reagimi bëhet pozitiv pak më vonë se me reaksionet e tjera. Në fazën fillestare të infeksionit, si rregull, vërehet një reagim negativ ose dobët pozitiv. Në fazën dytësore të sifilizit, ndonëse shfaqja e imobilizinave në serumin e gjakut të pacientit vërehet deri në 60%, reagimi është pozitiv në pothuajse gjysmën e subjekteve. Me një përsëritje të fazës dytësore të sifilizit, RIT është pozitiv në pothuajse 90% të pacientëve. Në fazën terciare të zhvillimit të sifilizit, me dëmtim të organeve të brendshme, përfshirë sistemin nervor, kur reagimi Wasserman jep rezultate negative, reagimi i imobilizimit të treponemës së zbehtë është pozitiv në pothuajse 100% të pacientëve. Në një fazë të hershme të sifilisit kongjenital, reagimi ka një rezultat pozitiv në pothuajse të gjithë pacientët, dhe në një fazë të vonë të sifilisit kongjenital - në pothuajse 100% të pacientëve. Sifilizi latent seropozitiv konfirmohet vetëm pas RIT, i cili kryhet pas marrjes së rezultateve pozitive gjatë testeve të tjera serologjike. RIT nuk përdoret për të kontrolluar sëmundjen tek pacientët të cilët kanë marrë trajtimin e nevojshëm.

Testi i imunofluoreshencës së absorbimit të treponema zbehtë (FTA-ABS).Nëse reaksioni kryhet për një pacient që ka sifiliz dhe nuk është trajtuar, atëherë ky reagim gjithmonë jep një rezultat pozitiv. Ekziston gjithashtu një probabilitet i lartë për të zbuluar një infeksion duke përdorur FTA-ABS në fillimin e sëmundjes.. Reagimi ka ndjeshmëri dhe specifikë të madhe. Për diagnozën e sifilizit latent dhe në rastet kur tashmë janë bërë disa analiza dhe kanë rezultuar negativ, por klinika flet për infeksion me treponemë të zbehtë, në raste të tilla shpesh diagnoza bëhet në bazë të rezultateve të FTA-ABS. . Fjalë për fjalë një javë pasi treponema e zbehtë hyri në trup, fillojnë të prodhohen antitrupa specifikë IgM, të cilat përfundimisht pushojnë së shfaquri dhe pas 2 vitesh nuk zbulohen më. Për të kuptuar nëse trajtimi i propozuar është efektiv, kryhen teste speciale që përcaktojnë specifikën e këtyre antitrupave. Sot ka disa teste të tilla, por ato janë shumë të shtrenjta për t'u kryer, kështu që këto analiza nuk kryhen për shumicën e pacientëve.

Reaksioni i hemaglutinimit, i cili përcakton antitrupat specifikë ndaj treponemës së zbehtë (mikro-TPHA). Për këtë reaksion treponema shërben si antigjen, ndaj ky reagim është shumë specifik dhe jep rezultate të vërteta në shumicën e rasteve.

Analiza e imunitetit enzimë (ELISA) një nga më specifiket për diagnostikimin e sifilizit. Sot, varianti indirekt i ELISA përdoret më shpesh. Përparësitë e kësaj metode kërkimore janë të dukshme: jo shumë kosto, lehtësia e zbatimit, saktësi e lartë e rezultatit, me ndihmën e kësaj analize është e mundur të zbulohet sifilizi në një fazë të hershme, rezultate të shpejta.

Në thelb metoda e imunoblotting qëndron analiza e imunitetit enzimë, e cila kombinohet me elektroforezën. Është një nga analizat më specifike dhe me ndihmën e tij konfirmohet infeksioni me sifiliz.

reaksioni zinxhir i polimerazës (metodë specifike kërkimore) kryhet për të vendosur një diagnozë në rrjedhën latente të infeksionit të sifilizit. Gjatë kryerjes së PCR, patogjeni gjendet në materialin e testimit, madje edhe në fazën fillestare të sëmundjes. Materiali gjenetik i zbuluar ndahet nga ADN-ja dhe kështu bëhet shumë e lehtë për të zbuluar patogjenin. Në neurosifilis, kur është shumë e vështirë të zbulohet një infeksion gjatë kryerjes së testeve të tjera për shkak të ndjeshmërisë shumë të ulët, në sifilizin kongjenital, në fazën parësore të sifilisit seronegativ dhe për vendosjen e një diagnoze te personat e infektuar me HIV, PCR është e domosdoshme. Studimi lëngu cerebrospinal me sifiliz, kryhet nëse ka lezione klinike të sistemit nervor në një fazë të hershme të sëmundjes, me formë latente dhe gjithmonë para fillimit të trajtimit. Gjithashtu, kjo analizë është e përshkruar për pacientët me neurosifilis në fazat e fundit të sifilizit dhe me një formë latente. Laboratori klinik kryen një studim të citozës, përmbajtjes së proteinave, reaksioneve Pandey dhe Nonne-Apelt. Në laboratorët serologjikë kryhen reaksioni Wasserman, reaksioni Lange, RIF, RIFyu, RIFts, RIT.

Faqja ofron informacion referencë vetëm për qëllime informative. Diagnoza dhe trajtimi i sëmundjeve duhet të bëhet nën mbikëqyrjen e një specialisti. Të gjitha barnat kanë kundërindikacione. Kërkohet këshilla e ekspertëve!

Diagnostifikimi sifilizit shpesh paraqet vështirësi. Vështirësia më e madhe në diagnostikim janë format kronike të sifilizit, sifilizi sekondar dhe faza latente e një lezioni sifilitik. Megjithatë, zbulimi i kësaj sëmundjeje duhet të bazohet në një skemë standarde.

Kontaktimi i një venerologu - pse është e nevojshme?

Në fazën e parë të diagnozës, është e nevojshme një konsultë personale me një venerolog. Bazuar në një konsultë personale, një venerolog është në gjendje të bëjë një diagnozë klinike.

Anamneza- mbledhja e informacionit të nevojshëm për të identifikuar diagnozën: ankesat e pacientit, informacioni për disa aspekte të jetës seksuale dhe kontaktet me të dyshuarit semundje seksualisht te transmetueshme persona. Sëmundjet seksualisht të transmetueshme në të kaluarën, informacione për rezultatet e trajtimit të tyre. I gjithë ky informacion i lejon mjekut që merr pjesë të përqendrohet në sëmundjet më të mundshme që kanë shkaktuar që pacienti të kërkojë ndihmë të specializuar.

I ndjekur nga ekzaminimi klinik. Mukoza dhe lëkura e organeve gjenitale, zona e anusit dhe mukoza e gojës i nënshtrohen ekzaminimit më të kujdesshëm. Vëmendje e shtuar i kushtohet palpimit të grupeve të jashtme të nyjeve limfatike, palpimit të vatrave nekrotike infektive të identifikuara. Shpesh në këtë fazë, diagnoza e sifilizit mund të bëhet me një shkallë mjaft të lartë probabiliteti.

Megjithatë, për të vendosur një diagnozë përfundimtare, si dhe për të monitoruar dinamikën e procesit gjatë trajtimit në vazhdim, është e nevojshme të kryhet testet laboratorike.

Konfirmimi laboratorik i sifilizit - çfarë përfshin dhe si bëhet?

Diagnoza laboratorike e sifilizit mund të ndahet në 2 grupe të kërkimit të vazhdueshëm: i pari ju lejon të identifikoni drejtpërdrejt agjentin shkaktar të sifilisit, ndërsa i dyti zbulon ndryshimet imunologjike që ndodhin në trup gjatë sifilizit.

Si mund ta identifikoni drejtpërdrejt agjentin shkaktar të sifilizit - treponemën e zbehtë?
1. mikroskopi i fushës së errët. Për shkak të disa veçorive të jashtme, treponema e zbehtë njolloset dobët me njollat ​​tradicionale të përdorura në mikroskopinë bakteriale. Prandaj, ka kuptim të përdoret një mikroskop i veçantë me fushë të errët. Në të, në një sfond të errët, një shirit spirale është i kontrastuar mirë - treponema e zbehtë.
Biomaterial për mikroskopin e fushës së errët merret nga fokusi primar i infeksionit - nga një ulçerë specifike sifilitike, skuqje e lëkurës, erozioni.

2. Reagimi i drejtpërdrejtë i fluoreshencës. Kësaj metode diagnostike i paraprin përpunimi i biomaterialit me një serum të veçantë fluoreshent, i cili çon në ngjitjen e komplekseve imune specifike në sipërfaqen e treponemës së zbehtë. Si rezultat i këtij reagimi, kur mikroskopi i biomaterialit të përpunuar në një mikroskop fluoreshent, treponema e zbehtë duket shkëlqyese dhe elegante.

3. PCR ( reaksioni zinxhir i polimerazës). Kjo metodë ju lejon të identifikoni ADN-në e një agjenti infektiv, duke e bërë të qartë praninë e tij në trupin e pacientit.

Si zbulohen shenjat imunologjike të sifilizit dhe pse duhen zbuluar ato?
I gjithë grupi i studimeve të parametrave imunologjikë me qëllim të diagnostikimit të sëmundjeve infektive quhet serologjia. Në ditët e sotme ka shumë metoda diagnostikuese serologjike, por të gjitha i bashkon fakti se biomaterial në diagnostikim është gjaku i pacientit. Për sa i përket diagnozës së sifilizit, të gjitha testet serologjike mund të ndahen në treponemale - zbulojnë antitrupa kundër elementëve strukturorë të treponemës së zbehtë dhe jo-treponemal - zbulojnë ndryshime imunologjike që lidhen me pasojat e aktivitetit bakterial.

Serologjia jo-treponemale
1. Mikroreaksioni i reshjeve (VDRL). Ky studim zbulon në gjakun e pacientit antitrupa të prodhuara nga sistemi imunitar kundër qelizave të dëmtuara nga treponema e zbehtë. Ky test ka besueshmëri të lartë, por specifikë të ulët. Fakti është se antitrupat e zbulueshëm mund të jenë të pranishëm në gjak në shumë sëmundje dhe gjendje patologjike. Prandaj, ky test përdoret vetëm si një depistim për një sëmundje, duke zbuluar një dyshim për një sëmundje. Megjithatë, kjo metodë ka një avantazh të paçmuar në diagnostikimin e efektivitetit të trajtimit. Nëse pacienti shërohet, mikroreaksioni i precipitimit me antigjenin kardiolipin bëhet negativ, ndryshe nga llojet e tjera të kërkimeve serologjike, të cilat mund të japin një rezultat pozitiv për një kohë të gjatë.

2. Reagimi i Wasserman. Ky studim shoqërohet me reaksionin e fiksimit të komplementit - një nga mekanizmat për zbatimin e përgjigjes imunologjike.
Testi vlerësohet në pluse ( jo në kryqe, siç besojnë shumë!). Dhe reagimi është negativ si rezultat i anketës tregoi minus), e dyshimtë ( si rezultat i sondazhit, tregohet 1 plus +), dobët pozitiv ( si rezultat i ekzaminimit, tregohen 2 pluse ++), reagim pozitiv ( si rezultat i ekzaminimit, tregohen 3 pluse +++), një reagim i mprehtë pozitiv ( si rezultat i ekzaminimit, tregohen 4 pluse ++++).

Serologjia treponemale
1. Reaksioni i imunofluoreshencës (RIF). Ky lloj studimi zbulon antitrupat e prodhuar nga sistemi imunitar i një personi të infektuar. Për këtë kryhet ndërveprimi i serumit të gjakut të pacientit dhe një preparati specifik që përmban antitrupa. Pas përzierjes së plazmës së gjakut të pacientit dhe reagentit me antitrupa specifikë të etiketuar me një substancë të veçantë fluoreshente, ato lidhen. Studimi kryhet duke përdorur një mikroskop të veçantë fluoreshent.

2. Analiza e imunitetit enzimë (ELISA). Kjo analizë meriton më shumë detaje. Meqenëse është kryesori në identifikimin e shumicës së sëmundjeve infektive. Metoda bazohet në një reaksion selektiv shumë specifik antigjen-antitrup. Një nga veçoritë e kësaj analize është se mund të përdoret për të zbuluar antitrupa të klasave të ndryshme ( IgA IgM IgG ) . E rëndësishme është gjithashtu aftësia e kësaj analize për të përcaktuar sasinë e antitrupave të zbuluar. Si rezultat, përcaktimi i llojit të antitrupave dhe përbërësit sasior të tij na lejon të nxjerrim një sërë përfundimesh në lidhje me kohëzgjatjen e sëmundjes, dinamikën e procesit, aktivitetin e patogjenit dhe sistemin imunitar të pacientit. Si rezultat, kjo analizë doli të jetë e domosdoshme në diagnostikimin e sëmundjeve infektive, si dhe monitorimin e dinamikës së sëmundjes në sfondin e trajtimit të vazhdueshëm.

3. Reaksioni i hemaglutinimit pasiv (RPHA). Ky reagim bazohet në aglutinimin imunologjikisht të induktuar të eritrociteve. Mekanizmi i këtij reagimi është që paraprakisht përgatiten eritrocitet, në sipërfaqen e të cilave janë fiksuar përbërësit proteinikë të treponemës së zbehtë. Prandaj, kur përzihet me plazmën e gjakut që përmban antitrupa ndaj treponemës, eritrocitet ngjiten së bashku - gjaku kthehet nga i kuq në grimcuar. Një reagim pozitiv i hemaglutinimit bëhet 4 javë pas infektimit. Pas trajtimit të suksesshëm të sifilizit, ky reagim mund të mbetet pozitiv gjatë gjithë jetës.

Nga sa më sipër, është e qartë se çështja e diagnostikimit, monitorimit të efektivitetit të trajtimit dhe kurimit është një punë mjaft e ndërlikuar dhe kërkon shumë kohë. Dhe është e pamundur që një pacient që nuk ka një arsim mjekësor të kuptojë qëllimet dhe rezultatet e studimit. Megjithatë, ne do të përpiqemi të paraqesim në një formë të arritshme dinamikën e ndryshimeve imunologjike në faza të ndryshme të sifilizit dhe treguesit laboratorikë që zbulojnë këto ndryshime.

Pra - pak teori. Pas infektimit, qelizat imune fillimisht ndeshen me treponemën e zbehtë. Duke e identifikuar atë si një mikroorganizëm të huaj, qelizat imunokompetente fillojnë formimin aktiv të një përgjigje imune. Antitrupa specifike për treponema pallidum IgM, gjenden në gjakun e pacientit 7 ditë pas infektimit, antitrupa IgG sintetizohet më vonë - pas 4 javësh. Këto 2 klasa të antitrupave janë të ndryshëm në strukturë, por është e rëndësishme për diagnozën që IgM sintetizohet në fazat e hershme të infeksionit ( Çfarë do të thotë për një infeksion të fundit?) ose në prani të aktivitetit të lartë të infeksionit. Zbulimi i IgG tregon vetëm formimin e një imuniteti të qëndrueshëm ndaj këtij infeksioni, vetëm një seri analizash të titrit të antitrupave në dinamikë na lejon të vlerësojmë shërimin e sëmundjes ose aktivitetin e infeksionit. Antilipid ( jo specifike) komplekset imunologjike sintetizohen në mënyrë aktive 4-5 javë pas infektimit.
I rëndësishëm është fakti që gjatë periudhës së manifestimeve klinike të sifilisit në gjak, zbulohen antitrupa specifikë për treponemën e zbehtë si. IgM, dhe klasën IgG (antitrupa totale). Një parametër i rëndësishëm në procesin e trajtimit është ndryshimi i parametrave sasiorë të antitrupave. Trajtimi i zgjedhur siç duhet kontribuon në një rënie të mprehtë të përqendrimit IgM, në sfondin e një niveli të qëndrueshëm IgG- këta tregues tregojnë formimin e imunitetit të qëndrueshëm ndaj treponemës së zbehtë në sfondin e një ulje të aktivitetit të saj infektiv. Është e nevojshme t'i kushtohet vëmendje faktit që antitrupat specifikë ndaj treponemës mund të qëndrojnë në gjakun e njeriut për shumë vite, duke dhënë rezultate pozitive në disa lloje studimesh.

Si të interpretohen rezultatet e studimeve serologjike?

Aktualisht, 3 reaksione përdoren gjerësisht në praktikën mjekësore: mikroreaksioni i precipitimit, reaksioni i imunofluoreshencës (RIF), reagimi i hemaglutinimit pasiv (RPHA).
mikroreaksioni i reshjeve reaksioni i imunofluoreshencës (RIF) reaksioni i hemaglutinimit pasiv (RPHA) Interpretimi
- - - Asnjë infeksion apo diagnozë shumë herët ( deri në 7 ditë pas infektimit)
+ + + Konfirmimi i sifilizit
- + + Gjendja pas trajtimit të sifilisit ose fazës së avancuar të sifilizit
+ - + Ekziston një probabilitet i lartë për rezultate false pozitive ose false negative ( rekomandohet të përsëritet diagnoza serologjike)
- - + Ekziston një probabilitet i lartë për një reagim fals-pozitiv të RPHA, ose një gjendje pas trajtimit adekuat të sifilisit
- + - Dëshmi e sifilisit të hershëm ose gjendjes pas trajtimit, reaksion RIF fals-pozitiv
+ - - Reagimi i rremë pozitiv i mikroprecipitimit

Nga tabela e mësipërme me rezultatet e analizave kryesore serologjike, shihet se diagnoza e sifilizit nuk mund të bazohet vetëm në analizat serologjike. Për të vendosur një diagnozë përfundimtare, përveç analizave të gjakut, nevojitet një kompleks studimesh klinike: anamnezë, ekzaminim personal i zonave të prekura, identifikimi i kontakteve të dyshimta.

Testet Reagin përdoren për shqyrtimin masiv të pacientëve për sifiliz. Zakonisht ato kryhen si pjesë e ekzaminimeve parandaluese. Teste të tilla janë të disponueshme në çdo institucion mjekësor dhe kryhen shpejt. Përgjigja është zakonisht gati pas 30-40 minutash.

Një rezultat pozitiv gjatë reaksioneve të reaginës nuk është kriter për të bërë një diagnozë. Nevojiten studime shtesë specifike për speciet.

Metoda më e zakonshme e shqyrtimit është reagimi Wasserman. Ai përdor kardiolipinë dhe antigjene treponemale. Nëse nuk ka reagina në serumin e gjakut, atëherë do të ndodhë hemoliza e eritrociteve të dashit, të cilat shtohen si tregues.

Në prani të reaginave, do të precipitojnë eritrocite të tëra, në këtë rast reaksioni konsiderohet pozitiv.

Reaginic në rastet e mëposhtme:

  • sëmundje të tjera, agjentët shkaktarë të të cilave janë të ngjashëm në strukturën antigjenike me spiroketën pallidum
  • shtatzënisë
  • sëmundjet onkologjike
  • duke marrë salicilate
  • infarkti miokardial
  • gabime teknike në analizë

Me një rezultat pozitiv të reaksionit reaginik, kryhen teste serologjike specifike. Ato gjithashtu përshkruhen nëse një rezultat negativ është në dyshim.

Antigjenet treponemale përdoren në analiza të tilla si RIF, RIT, ELISA, TPHA, reaksioni i hemadsorbimit në fazën e ngurtë. Këto reaksione bazohen në formimin e komplekseve antigjen-antitrup dhe ndryshojnë në metodën e përcaktimit të tyre. Reagimi më i përdorur është imunofluoreshenca.

Ilaçi trajtohet me serum lumineshent, i cili ju lejon të përcaktoni komplekset imune nën një mikroskop fluoreshent.

Një nga testet serologjike më të ndjeshme për diagnostikimin e sifilizit është TPHA. Metoda ka saktësi të lartë. Shpesh përdoret për të verifikuar diagnozën gjatë shtatzënisë kur testet e tjera mund të japin një rezultat të rremë pozitiv.

Karakteristikat e serodiagnozës

Për diagnoza serologjike e sifilizit në periudha të ndryshme të tij nxjerr gjak nga një venë. Analiza rekomandohet të kryhet me stomak bosh, kjo zvogëlon numrin e rezultateve false pozitive. Tubi duhet të jetë steril. Gjatë kryerjes së testeve ekspres, në disa raste, gjaku merret nga një gisht.

Nëse dyshohet, lëngu cerebrospinal merret për serodiagnozë. Për analizën e tij, përdoren të njëjtat metoda si në studimin e gjakut.

Për të diagnostikuar sifilizin, bëni një ekzaminim të plotë në klinikën tonë.