Diagnostic sérologique de l'infection syphilitique. Méthodes et algorithmes de laboratoire modernes pour le diagnostic de la syphilis. Comment interpréter les tests de syphilis

Taxonomie de Borrelia, Leptospira et Treponema, et les noms des maladies causées par eux.

Famille : Spirochaetaceae

Genre : Borrelia

Espèce: B. recurrentis - l'agent causal de la fièvre récurrente épidémique.

Genre : Tréponème

Espèce: T. pallidum - l'agent causal de la syphilis

Genre : Leptospira

Espèce: L. Icterohaemorrhagiae - l'agent causal de la leptospirose

Diagnostic microscopique de la syphilis.

Microscopie à fond noir : avant l'étude, le liquide tissulaire est prélevé au fond de l'ulcère ou d'un point ponctué du ganglion lymphatique. Une préparation d'une goutte écrasée est préparée: une goutte du matériau à tester est appliquée au milieu de la lame de verre, la goutte est recouverte d'une lamelle afin qu'il n'y ait pas de bulles d'air. Résultat positif: des tréponèmes avec 8 à 12 grandes boucles uniformes sont trouvés en microscopie. Ils se caractérisent par des mouvements de rotation-translation, de type pendule et de flexion lisses.Lorsqu'ils sont colorés selon Romanovsky-Giemsa: l'agent causal de la syphilis devient rose pâle, les autres tréponèmes deviennent rouge-violet.

Réactions utilisées dans le sérodiagnostic de la syphilis. Caractéristiques générales de chacun d'eux.

RSK(Réaction de Wasserman) : Composants : 1 système - sérum du patient, diagnosticum, complément, CNI ; 2 système - sérum hémolytique et une suspension d'érythrocytes de mouton. 1 système est préparé, incubé à 37°C pendant 1 heure Un deuxième système est ajouté, incubé à 37°C pendant 1 heure Un résultat positif est l'absence d'hémolyse.

RPGA: Composants : CNI, sérum du patient, diagnostic érythrocytaire. Des dilutions de sérum sont préparées, du diagnosticum est ajouté, dans un thermostat pendant 24 heures à 37°C. Sol. résultat : parapluie.

ELISA: Composants : sérum de patient, diagnosticum, conjugué, substrat chromogénique. Le diagnosticum est relié au plastique du puits du comprimé, le sérum dilué, le conjugué et le substrat sont ajoutés. Sol. résultat : un changement de la couleur du substrat.

FRR indirect: AG est appliqué sur une lame de verre - tréponème pâle (souche Nichols). Les frottis sont séchés à l'air et fixés dans l'acétone pendant 5 minutes. Le sérum du patient est appauvri avec une suspension de tréponèmes non pathogènes de la souche Reiter ou dilué au 1:200, puis appliqué sur les préparations préparées. Conserver dans une chambre humide à 35°C pendant 30 minutes (1 phase). Les frottis sont lavés 10 minutes en ICN et séchés. Ensuite, une goutte de sérum fluorescent contre la globuline humaine est appliquée sur la préparation et incubée en chambre humide à température ambiante pendant 30 minutes (phase 2). Les frottis sont lavés à l'ICN et séchés. vue au microscope à fluorescence. Réaction positive : lueur verte.

Réaction de floculation sur verre: du plasma sanguin ou du sérum non chauffé est mélangé à un antigène lipidique non spécifique pendant plusieurs minutes sur une lame de verre. Résultat positif : les particules d'antigène agrandies (floculation) sont visibles sous un faible grossissement.

Sérodiagnostic de la syphilis à l'aide du RPHA.

Composants : CNI, sérum du patient, diagnostic érythrocytaire. Des dilutions de sérum sont préparées, du diagnosticum est ajouté, dans un thermostat pendant 24 heures à 37°C. Sol. résultat : parapluie.

Sérodiagnostic de la syphilis par ELISA.

Composants : sérum du patient, diagnosticum, conjugué, substrat chromogénique. Le diagnosticum est relié au plastique du puits du comprimé, le sérum dilué, le conjugué et le substrat sont ajoutés. Sol. résultat : un changement de la couleur du substrat.

Sérodiagnostic de la syphilis par RSK.

Réaction de Wasserman: vous pouvez utiliser le sérum sanguin et le liquide céphalo-rachidien du patient (au stade de la neurosyphilis). En tant que diagnosticum - antigène tréponémique ou cardiolipine. Composants : 1 système - sérum du patient, diagnosticum, complément, CNI ; 2 système - sérum hémolytique et une suspension d'érythrocytes de mouton. 1 système est préparé, incubé à 37°C pendant 1 heure Un deuxième système est ajouté, incubé à 37°C pendant 1 heure Un résultat positif est l'absence d'hémolyse.

Méthodes de diagnostic microbiologique de la leptospirose.

Méthode bactérioscopique: préparez une préparation d'une goutte écrasée, étudiez-la au microscope à fond noir: fils minces mobiles avec des courbures aux extrémités (boucles secondaires) - sous la forme d'un support ou de la lettre S.

Méthode bactériologique: matériel - sang, urine, liquide céphalo-rachidien. Le matériel est ensemencé (3-5 éprouvettes) dans un milieu eau-sérum, Fletcher's medium, Potato. Incubé jusqu'à 30 jours à 28-30C dans une atmosphère de CO 2 . Pour détecter la croissance des leptospires, 10 jours après l'inoculation, du matériel est prélevé dans le tube à essai, une préparation de potassium broyé est préparée et étudiée au microscope à fond noir. À partir du tube à essai où la croissance des leptospires a été constatée, ils sont sous-cultivés dans 3 tubes à essai avec un milieu nutritif frais, incubés pendant 7 à 10 jours, la température est la même. Pour la différenciation, un test au bicarbonate est effectué, l'activité hémolytique, l'activité phospholipase sont déterminées. Identifié par la structure antigénique à l'aide de sérums agglutinants.

recherche biologique: Des cobayes sont injectés par voie intrapéritonéale avec 1 g du matériel d'essai et observés pendant un mois, en notant la température et le poids corporel, l'apparition d'ictère et d'hémorragies, ainsi que la mort de l'animal.

Etude sérologique: AT dans le sérum apparaissent à partir de 2 semaines. Utiliser la réaction de microagglutination et de lyse des leptospires. Le sérum du patient est dilué deux fois de 1:100 à 1:1600. 0,2 ml de sérum dilué et la même quantité d'une culture vivante de souches de Leptospira sont ajoutés à un certain nombre de tubes à essai. Incuber 1h à 37C. Une préparation de gouttes écrasées est préparée à partir du contenu de chaque tube à essai et microscopique. Les anticorps dans le sérum des premières dilutions provoquent la lyse - dissolution ou gonflement granuleux des leptospires. Dans les dilutions ultérieures - agglutination - s'agglomèrent sous forme d'araignées. La valeur diagnostique a une réaction positive dans une dilution de 1:400 et plus.

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Université nationale russe de recherche médicale. NI Pirogova

Département de dermatovénérologie, Faculté de pédiatrie

Rapport sur le sujet : Méthodes de laboratoire pour le diagnostic de la syphilis

Réalisé par : Étudiant 440 en groupe

Faculté de pédiatrie

Seranov Igor Anatolievitch

    Études non tréponémiques

    Études tréponémiques

    Complexe pour la conduite de réactions sérologiques

    Réaction de Wasserman

    Réaction d'immunofluorescence

    réaction d'adhésion immunitaire

    Réaction d'immobilisation de Treponema pallidum

    Réaction d'immunofluorescence par adsorption de Treponema pallidum

    Réaction d'hémagglutination

    Dosage d'immunosorbant lié

    réaction en chaîne par polymérase

Toutes les méthodes de recherche sérologique utilisées aujourd'hui sont conditionnellement divisées en deux types: non tréponémique, qualification (NTT) - et tréponémique, qui confirment la présence de l'agent pathogène (TT).La syphilis est très difficile, la clinique est très floue et ne se manifeste pas toujours, par conséquent, plusieurs tests sérologiques sont utilisés à la fois pour poser le bon diagnostic. Avec confirmation visuelle de la présence de tréponème pâle dans le matériel prélevé (à l'aide d'un microscope), le diagnostic est posé immédiatement et d'autres tests sont rarement effectués.

Études non tréponémiques(tests) - Les NTT sont des études dites de dépistage, elles ne sont pas très chères et avec leur aide, vous pouvez examiner un assez grand nombre de patients, de plus, les résultats de nombreux tests sont prêts très rapidement. Mais avec une fausse évolution de la maladie, avec une faible sensibilité, de tels tests ne sont pas pratiques et un résultat à 100% ne peut être obtenu.

Lors de la conduite non tréponémique tests dans le matériau examiné, des anticorps sont détectés qui réagissent avec cardiolipine - antigène lécithine. L'un des premiers tests était une méthode basée sur la réaction immunologique de Bordet-Jangu, où l'extrait de foie d'un nouveau-né décédé de la syphilis agissait comme un antigène. Aujourd'hui, lors de la réalisation de tels tests, l'antigène est lécithine, cholestérol et cardiolipine.

A l'étranger, en particulier aux USA, 4 méthodes non tréponémiques sont utilisées, qui se divisent en deux types : les méthodes permettant de déterminer visuellement les résultats de la réaction (RPR et TRUST) et les méthodes de lecture microscopique des résultats (USR et VDRL).

Les méthodes de diagnostic non tréponémiques comprennent test d'immunosorbant lié utilisant la cardiolipine comme antigène. Dans notre pays et dans les pays de la CEI, la réaction du plasma avec sérum inactivé (MR) et la réaction dans laquelle le compliment est associé à cardiolipine (RCC).

Toutes les méthodes de diagnostic non tréponémiques sont très similaires les unes aux autres. Ils ont tous un faible coût, ils sont simples et rapides à réaliser. Ces types de tests ne conviennent pas pour détecter la maladie au stade primaire et pour la syphilis qui survient secrètement (forme latente de la syphilis). Les anticorps déterminés par un test non tréponémique apparaissent environ un mois après l'infection par le tréponème. Dans la plupart des cas, chez les patients qui ont été traités pour le stade primaire de la syphilis, les tests non tréponémiques sont négatifs pendant environ un an.

Études tréponémiques(tests) - Les TT sont beaucoup plus chers, la technique est très complexe et ils sont utilisés pour confirmer les résultats positifs obtenus dans des études non tréponémiques.

Comme nous l'avons dit plus haut méthodes tréponémiques utilisé pour confirmer la présence de tréponème pâle dans le corps, qui a été détecté à l'aide de tests non tréponémiques. Ils sont également effectués si les tests effectués n'ont pas donné de résultat positif, mais que la clinique suggère la présence d'une maladie. Après la guérison complète de la syphilis, plus de 80% des personnes guéries ont une réaction positive lors de la réalisation de tests tréponémiques pendant plusieurs années, et pour certains - à vie. Sur cette base, les tests tréponémiques ne sont pas utilisés pour les examens préventifs chez les personnes qui ont terminé un traitement complet.

La recherche scientifique dans le domaine de l'immunologie et de la biologie moléculaire se poursuit constamment et avec l'aide des dernières technologies, de plus en plus de nouveaux tests pour le diagnostic de la syphilis émergent, qui sont fermement en tête. L'un de ces tests, qui s'est solidement établi dans la pratique - dosage immunoenzymatique (ELISA), et de nombreuses méthodes de recherche sont en cours de développement.

Ce complexe de tests sérologiques, qui est réalisée en Russie, comprend une conduite complète des réactions sérologiques :

réactions sérologiques standard -

    réaction de fixation du complément (réaction de Wassermann),

    réaction avec l'antigène tréponémique et réaction avec la cardiolipine ;

réactions tréponémiques de groupe -

    réaction d'immunofluorescence (RIF)

    réaction d'adhésion immunitaire (RIP);

réactions tréponémiques protéiques spécifiques à l'espèce -

    réaction d'immobilisation des tréponèmes (RIT),

    RIF - abs et ses variantes (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

    réaction d'hémaglucination passive des tréponèmes (TPHA).

Si les tests sérologiques sont utilisés en combinaison, cela permettra d'identifier la maladie dans les premiers stades de la maladie.

La réaction de Wasserman est une méthode de fixation du complément. Pour effectuer la réaction, des extraits sont utilisés comme antigène, qui sont fabriqués à partir de tréponèmes pâles (antigènes spécifiques) et la cardiolipine est un extrait préparé à partir du muscle cardiaque d'un taureau (antigènes non spécifiques). Plus on observe de tréponèmes pâles dans le matériel de test, plus le degré de la maladie est élevé et évaluez le degré avec des avantages:

1) - négatif ; 2) + douteux ; 3) ++ faiblement positif ; 4) +++ positif ; 5) ++++ fortement positif.

Réaction de Wasserman (réaction de fixation du complément) sans faute, ils sont réalisés avec des réactions sédimentaires - Sachs - Vitebsky et Kahn. La nature immunologique des réactions est, en général, la même que celle de la réaction de Wasserman, mais ces réactions nécessitent des antigènes plus saturés, qui, lorsqu'ils réagissent avec des réagines sériques, donnent un précipité plus important. La syphilis primaire séronégative est diagnostiquée si les tests sérologiques standards sont négatifs. Détection de la syphilis La réaction de Wasserman est efficace dans la syphilis secondaire séropositive, ici les résultats du test sont 100% corrects. Au stade tertiaire de la syphilis active, les résultats sont corrects chez plus de la moitié des patients, et dans les derniers stades de la syphilis, avec atteinte des organes et systèmes internes, les résultats sont corrects chez la moitié des patients. À patients atteints de syphilis congénitale précoce, les tests sérologiques donnent presque toujours un résultat positif, et chez les patients atteints de syphilis congénitale tardive - dans près de 80% des cas.

Le principe de RSK est que les réagines trouvées dans le sérum sanguin des patients atteints de syphilis ont la capacité d'entrer dans des composés avec divers antigènes. Les complexes résultants trient le complément introduit dans la réaction. Un système hémolytique (un mélange d'érythrocytes de bélier avec du sérum hémolytique) est utilisé pour indiquer le complexe réagine-antigène-complément. En présence du complexe, les érythrocytes précipitent. Ce qui est perceptible à l'œil nu. La gravité de l'hémolyse est indiquée par le médecin à l'aide des touches : fortement positif 4+, positif 3+, faiblement positif 2+ ou 1+ et négatif. En plus d'une évaluation qualitative de ces réactions, il existe également une évaluation quantitative, qui est importante dans le diagnostic de certains stades de la syphilis et dans le suivi de l'efficacité du traitement.

Réaction d'immunofluorescence (RIF) Il est basé sur la détection d'anticorps marqués avec une solution fluorescente spéciale afin de détecter les anticorps associés à l'antigène dans les rayons violets d'une lampe à quartz. Cette réaction est très sensible et aide à identifier la maladie au stade primaire de la syphilis séronégative. C'est également ce test qui permet d'identifier la maladie chez les patients chez qui la maladie est latente ou à un stade avancé. Il existe plusieurs types de telles réactions, et le RIF-200 est le plus apprécié, avec lequel vous pouvez détecter la syphilis latente et reconnaître les résultats non spécifiques de la RSE. Mais, malgré les taux élevés de RIF-200, le diagnostic est posé après que tous les tests cliniques ont été effectués. RIF n'est pas adapté au suivi des patients après un traitement complet, car il est plutôt lentement négatif au stade du traitement.

Réaction d'adhésion immunitaire (RIP). Cette réaction est basée sur l'adhésion des tréponèmes, sensibilisés par le sérum, aux érythrocytes et leur précipitation. Les résultats sont évalués selon le tableau suivant :

Négatif - 0-20%

Douteux-21-30 % ;

Faiblement positif - 31-50 % ;

Positif-51-100 %.

À tous égards, RIP est très similaire à RIF et RIT. Cette réaction est réalisée dans plusieurs cas, si la syphilis n'est pas confirmée sur la base de manifestations cliniques, d'anamnèse, de tests de laboratoire, pour contrôler la maladie après avoir reçu le traitement nécessaire et pour confirmer les résultats de la RSE.

Réaction d'immobilisation de Treponema pallidum (RIT) Une fois dans un environnement où il y a des immobilizines du sérum à tester et du complément actif, les tréponèmes pâles perdent leur mobilité. C'est la base de cette réaction. Le RIT est très spécifique et est utilisé pour détecter la syphilis latente, pour diagnostiquer les femmes enceintes chez qui la syphilis est suspectée et de nombreux autres cas dans lesquels les tests sérologiques standard sont peu spécifiques. Le gros inconvénient de cette réaction est qu'elle est très coûteuse et que c'est un procédé très compliqué à mettre en oeuvre. Les résultats sont lus en fonction des données de pourcentage d'immobilisation des tréponèmes pâles :

Négatif - jusqu'à 20 % ; -douteux -21-30 % ; - faiblement positif -31-50 % ; -positif -51-100%.

En raison du fait que les immobilisines apparaissent dans le sang plus tard que les autres anticorps, la réaction devient positive un peu plus tard qu'avec d'autres réactions. Au stade initial de l'infection, en règle générale, une réaction négative ou faiblement positive est observée. Au stade secondaire de la syphilis, bien que l'apparition d'immobilizines dans le sérum sanguin du patient soit observée jusqu'à 60%, la réaction est positive chez près de la moitié des sujets. Avec une récidive du stade secondaire de la syphilis, la RIT est positive chez près de 90% des patients. Au stade tertiaire du développement de la syphilis, avec des lésions des organes internes, y compris du système nerveux, lorsque la réaction de Wasserman donne des résultats négatifs, la réaction d'immobilisation du tréponème pâle est positive chez près de 100% des patients. À un stade précoce de la syphilis congénitale, la réaction a un résultat positif chez presque tous les patients et à un stade tardif de la syphilis congénitale - chez près de 100% des patients. La syphilis latente séropositive n'est confirmée qu'après RIT, qui est réalisée après l'obtention de résultats positifs lors d'autres tests sérologiques. RIT n'est pas utilisé pour contrôler la maladie chez les patients qui a reçu le traitement nécessaire.

Test d'immunofluorescence par absorption de Treponema pallidum (FTA-ABS).Si la réaction est effectuée pour un patient atteint de syphilis et n'a pas été traité, cette réaction donne toujours un résultat positif. Il existe également une forte probabilité de détecter une infection à l'aide de FTA-ABS au tout début de la maladie.. La réaction a une grande sensibilité et spécificité. Pour le diagnostic de la syphilis latente et dans les cas où plusieurs tests ont déjà été effectués et ont montré un résultat négatif, mais la clinique parle d'infection par un tréponème pâle, dans de tels cas, le diagnostic est souvent posé sur la base des résultats de FTA-ABS . Littéralement une semaine après l'entrée du tréponème pâle dans le corps, des anticorps IgM spécifiques commencent à être produits, qui finissent par cesser d'apparaître et après 2 ans ne sont plus détectés. Afin de comprendre si le traitement proposé est efficace, des tests spéciaux sont effectués pour déterminer la spécificité de ces anticorps. Il existe plusieurs tests de ce type aujourd'hui, mais ils sont trop coûteux à réaliser, de sorte que ces tests ne sont pas effectués pour la plupart des patients.

Réaction d'hémagglutination, qui détermine les anticorps spécifiques au tréponème pâle (micro-TPHA). Pour cette réaction, les tréponèmes servent d'antigène, cette réaction est donc très spécifique et donne de vrais résultats dans la plupart des cas.

Dosage immunoenzymatique (ELISA) l'un des plus spécifiques pour le diagnostic de la syphilis. Aujourd'hui, la variante indirecte d'ELISA est le plus souvent utilisée. Les avantages de cette méthode de recherche sont évidents: pas trop cher, facilité de mise en œuvre, grande précision du résultat, à l'aide de cette analyse, il est possible de détecter la syphilis à un stade précoce, des résultats rapides.

Au coeur méthode d'immunotransfert se trouve l'immunodosage enzymatique, qui est combiné avec l'électrophorèse. C'est l'un des tests les plus spécifiques et avec son aide, l'infection par la syphilis est confirmée.

réaction en chaîne par polymérase (méthode de recherche spécifique) effectué pour établir un diagnostic dans l'évolution latente de l'infection par la syphilis. Lors de la réalisation d'une PCR, l'agent pathogène se trouve dans le matériel de test, même au stade initial de la maladie. Le matériel génétique détecté est divisé par l'ADN et il devient donc très facile de détecter l'agent pathogène. Dans la neurosyphilis, lorsqu'il est très difficile de détecter une infection lors de la réalisation d'autres tests en raison d'une très faible sensibilité, dans la syphilis congénitale, au stade primaire de la syphilis séronégative, et pour poser un diagnostic chez les personnes infectées par le VIH, la PCR est indispensable. Étude liquide cérébro-spinal avec la syphilis, elle est réalisée s'il existe des lésions cliniques du système nerveux à un stade précoce de la maladie, avec une forme latente, et toujours avant le début du traitement. En outre, cette analyse est prescrite pour les patients atteints de neurosyphilis aux derniers stades de la syphilis et avec une forme latente. Le laboratoire clinique effectue une étude de la cytose, de la teneur en protéines, des réactions de Pandey et de Nonne-Apelt. Dans les laboratoires sérologiques, la réaction de Wasserman, la réaction de Lange, RIF, RIFyu, RIFts, RIT sont réalisées.

Le site fournit des informations de référence à titre informatif uniquement. Le diagnostic et le traitement des maladies doivent être effectués sous la supervision d'un spécialiste. Tous les médicaments ont des contre-indications. L'avis d'un expert s'impose !

Diagnostique syphilis présente souvent des difficultés. La plus grande difficulté de diagnostic concerne les formes chroniques de syphilis, la syphilis secondaire et la phase latente d'une lésion syphilitique. Cependant, la détection de cette maladie doit être basée sur un schéma standard.

Contacter un vénéréologue - pourquoi est-ce nécessaire ?

Au premier stade du diagnostic, une consultation personnelle avec un vénéréologue est nécessaire. Sur la base d'une consultation personnelle, un vénéréologue est en mesure de poser un diagnostic clinique.

Anamnèse- recueil des informations nécessaires à l'identification du diagnostic : plaintes des patients, informations sur certains aspects de la vie sexuelle et contacts avec des suspects maladies sexuellement transmissibles personnes. Maladies sexuellement transmissibles passées, informations sur les résultats de leur traitement. Toutes ces informations permettent au médecin traitant de se concentrer sur les maladies les plus probables qui ont poussé le patient à consulter un spécialiste.

Suivie par Examen clinique. Les muqueuses et la peau des organes génitaux, de la région de l'anus et de la muqueuse buccale sont soumises à l'examen le plus minutieux. Une attention accrue est accordée à la palpation des groupes externes de ganglions lymphatiques, à la palpation des foyers nécrotiques infectieux identifiés. Souvent, à ce stade, le diagnostic de syphilis peut être posé avec un degré de probabilité assez élevé.

Cependant, afin de poser un diagnostic final, ainsi que de surveiller la dynamique du processus au cours du traitement en cours, il est nécessaire de procéder à tests de laboratoire.

Confirmation en laboratoire de la syphilis - que comprend-elle et comment est-elle effectuée ?

Le diagnostic de laboratoire de la syphilis peut être divisé en 2 groupes de recherche en cours: le premier vous permet d'identifier directement l'agent causal de la syphilis, tandis que le second révèle les changements immunologiques qui se produisent dans le corps au cours de la syphilis.

Comment pouvez-vous identifier directement l'agent causal de la syphilis - le tréponème pâle?
1. microscopie à fond noir. En raison de certaines caractéristiques externes, le tréponème pâle se colore mal avec les colorants traditionnels utilisés en microscopie bactérienne. Par conséquent, il est logique d'utiliser un microscope spécial à fond noir. Dans celui-ci, sur un fond sombre, une bande en spirale est bien contrastée - tréponème pâle.
Le biomatériau pour la microscopie à fond noir provient du foyer principal de l'infection - d'un ulcère syphilitique spécifique, d'une éruption cutanée, d'une érosion.

2. Réaction de fluorescence directe. Cette méthode de diagnostic est précédée du traitement du biomatériau avec un sérum fluorescent spécial, ce qui conduit à la fixation de complexes immuns spécifiques à la surface du tréponème pâle. À la suite de cette réaction, lors de la microscopie du biomatériau traité dans un microscope à fluorescence, le tréponème pâle semble lumineux et élégant.

3. PCR ( réaction en chaîne par polymérase). Cette méthode vous permet d'identifier l'ADN d'un agent infectieux, en rendant claire sa présence dans le corps du patient.

Comment les signes immunologiques de la syphilis sont-ils détectés et pourquoi devraient-ils être détectés ?
L'ensemble du groupe d'études des paramètres immunologiques dans le but de diagnostiquer les maladies infectieuses s'appelle sérologie. De nos jours, il existe de nombreuses méthodes de diagnostic sérologique, mais toutes sont unies par le fait que le biomatériau du diagnostic est le sang du patient. En ce qui concerne le diagnostic de la syphilis, tous les tests sérologiques peuvent être divisés en tréponémiques - détectant les anticorps dirigés contre les éléments structuraux du tréponème pâle et non tréponémiques - révélant des modifications immunologiques associées aux conséquences de l'activité bactérienne.

Sérologie non tréponémique
1. Microréaction de précipitation (VDRL). Cette étude détecte dans le sang du patient des anticorps produits par le système immunitaire contre les cellules endommagées par le tréponème pâle. Ce test a une grande fiabilité, mais une faible spécificité. Le fait est que des anticorps détectables peuvent être présents dans le sang dans de nombreuses maladies et états pathologiques. Par conséquent, ce test n'est utilisé que pour le dépistage d'une maladie, révélant une suspicion de maladie. Cependant, cette méthode a un avantage inestimable pour diagnostiquer l'efficacité du traitement. Si le patient est guéri, la microréaction de précipitation avec l'antigène cardiolipine devient négative, contrairement à d'autres types de recherche sérologique, qui peuvent donner un résultat positif pendant longtemps.

2. Réaction de Wasserman. Cette étude est associée à la réaction de fixation du complément - l'un des mécanismes de mise en œuvre de la réponse immunologique.
Le test est évalué en plus ( pas en croix, comme beaucoup le croient !). Et la réaction est négative à la suite de l'enquête indiqué moins), douteux ( à la suite de l'enquête, 1 plus + est indiqué), faiblement positif ( à la suite de l'examen, 2 plus sont indiqués ++), réaction positive ( à la suite de l'examen, 3 plus sont indiqués +++), une réaction très positive ( à la suite de l'examen, 4 plus sont indiqués ++++).

Sérologie tréponémique
1. Réaction d'immunofluorescence (RIF). Ce type d'étude détecte les anticorps produits par le système immunitaire d'une personne infectée. Pour cela, l'interaction du sérum sanguin du patient et d'une préparation spécifique contenant des anticorps est réalisée. Après avoir mélangé le plasma sanguin du patient et le réactif avec des anticorps spécifiques marqués avec une substance fluorescente spéciale, ils sont liés. L'étude est réalisée à l'aide d'un microscope à fluorescence spécial.

2. Dosage immunoenzymatique (ELISA). Cette analyse mérite plus de détails. Puisqu'il est le principal dans l'identification de la plupart des maladies infectieuses. La méthode est basée sur une réaction sélective antigène-anticorps hautement spécifique. L'une des caractéristiques de cette analyse est qu'elle peut être utilisée pour détecter des anticorps de différentes classes ( IgA IgM IgG ). La capacité de cette analyse à déterminer la quantité d'anticorps détectés est également importante. En conséquence, la détermination du type d'anticorps et de sa composante quantitative nous permet de tirer un certain nombre de conclusions sur la durée de la maladie, la dynamique du processus, l'activité de l'agent pathogène et le système immunitaire du patient. En conséquence, cette analyse s'est avérée indispensable pour diagnostiquer les maladies infectieuses, ainsi que pour surveiller la dynamique de la maladie dans le contexte d'un traitement en cours.

3. La réaction d'hémagglutination passive (RPHA). Cette réaction est basée sur l'agglutination immunologique des érythrocytes. Le mécanisme de cette réaction est que les érythrocytes sont préalablement préparés, à la surface desquels les composants protéiques du tréponème pâle sont fixés. Par conséquent, lorsqu'ils sont mélangés avec du plasma sanguin contenant des anticorps contre le tréponème, les érythrocytes se collent - le sang passe du rouge au granuleux. Une réaction d'hémagglutination positive devient 4 semaines après l'infection. Après un traitement réussi de la syphilis, cette réaction peut rester positive tout au long de la vie.

De ce qui précède, il ressort que la question du diagnostic, du suivi de l'efficacité du traitement et de la guérison est un travail assez compliqué et chronophage. Et il est impossible pour un patient qui n'a pas de formation médicale de comprendre les objectifs et les résultats de l'étude. Cependant, nous essaierons de présenter sous une forme accessible la dynamique des changements immunologiques aux différents stades de la syphilis, et les indicateurs de laboratoire qui révèlent ces changements.

Donc - un peu de théorie. Après l'infection, les cellules immunitaires rencontrent pour la première fois le tréponème pallidum. En l'identifiant comme un micro-organisme étranger, les cellules immunocompétentes commencent la formation active d'une réponse immunitaire. Anticorps spécifiques au tréponème pallidum IgM, se retrouvent dans le sang du patient 7 jours après l'infection, des anticorps IgG synthétisé plus tard - après 4 semaines. Ces 2 classes d'anticorps sont de structure différente, mais il est important pour le diagnostic que IgM synthétisé dans les premiers stades de l'infection ( Qu'est-ce que cela signifie pour une infection récente?) ou en présence d'une forte activité infectieuse. La détection d'IgG indique seulement la formation d'une immunité stable à cette infection, seule une série d'analyses du titre d'anticorps en dynamique permet d'évaluer la guérison de la maladie ou l'activité de l'infection. Antilipidique ( non spécifique) les complexes immunologiques sont activement synthétisés 4 à 5 semaines après l'infection.
Il est important de noter que pendant la période des manifestations cliniques de la syphilis dans le sang, des anticorps spécifiques du tréponème pâle sont détectés comme IgM, et la classe IgG (anticorps totaux). Un paramètre important dans le processus de traitement est le changement des paramètres quantitatifs des anticorps. Un traitement correctement sélectionné contribue à une forte diminution de la concentration IgM, dans un contexte de niveau stable IgG- ces indicateurs indiquent l'immunité stable formée contre le tréponème pâle dans le contexte d'une diminution de son activité infectieuse. Il faut faire attention au fait que des anticorps spécifiques au tréponème peuvent rester dans le sang humain pendant de nombreuses années, donnant des résultats positifs dans certains types d'études.

Comment interpréter les résultats des études sérologiques ?

Actuellement, 3 réactions sont largement utilisées dans la pratique médicale : la microréaction de précipitation, la réaction d'immunofluorescence (RIF), la réaction d'hémagglutination passive (RPHA).
microréaction de précipitation réaction d'immunofluorescence (RIF) réaction d'hémagglutination passive (RPHA) Interprétation
- - - Pas d'infection ou diagnostic trop précoce ( jusqu'à 7 jours après l'infection)
+ + + Confirmation de la syphilis
- + + État après traitement de la syphilis ou stade avancé de la syphilis
+ - + Il y a une forte probabilité de résultats faux positifs ou faux négatifs ( il est recommandé de répéter le diagnostic sérologique)
- - + Il y a une forte probabilité d'une réaction faussement positive de RPHA, ou d'une condition après un traitement adéquat de la syphilis
- + - Preuve de syphilis précoce ou d'un état post-traitement, réaction RIF faussement positive
+ - - Réaction de microprécipitation faussement positive

Du tableau ci-dessus avec les résultats des principaux tests sérologiques, on peut voir que le diagnostic de la syphilis ne peut pas être basé sur les seuls tests sérologiques. Pour établir un diagnostic final, en plus des tests sanguins, un ensemble d'études cliniques est nécessaire: anamnèse, examen personnel des zones touchées, identification des contacts suspects.

Les tests Reagin sont utilisés pour le dépistage de masse des patients atteints de syphilis. Ils sont généralement réalisés dans le cadre d'examens préventifs. Ces tests sont disponibles dans tous les établissements médicaux et sont effectués rapidement. La réponse est généralement prête après 30 à 40 minutes.

Un résultat positif lors de réactions réactives n'est pas un critère de diagnostic. Des études supplémentaires spécifiques aux espèces sont nécessaires.

La méthode de dépistage la plus courante est la réaction de Wasserman. Il utilise des antigènes cardiolipine et tréponémique. S'il n'y a pas de réagines dans le sérum sanguin, il se produira une hémolyse des érythrocytes de bélier, qui sont ajoutés comme indicateur.

En présence de réagines, des érythrocytes entiers précipiteront, auquel cas la réaction est considérée comme positive.

Réaginique dans les cas suivants :

  • autres maladies dont les agents responsables ont une structure antigénique similaire à celle du spirochète pallidum
  • grossesse
  • maladies oncologiques
  • prendre des salicylates
  • infarctus du myocarde
  • erreurs techniques dans l'analyse

Avec un résultat positif de la réaction réaginique, des tests sérologiques spécifiques sont effectués. Ils sont également prescrits en cas de doute sur un résultat négatif.

Les antigènes tréponémiques sont utilisés dans des dosages tels que RIF, RIT, ELISA, TPHA, réaction d'hémadsorption en phase solide. Ces réactions sont basées sur la formation de complexes antigène-anticorps et diffèrent par la méthode de leur détermination. La réaction la plus couramment utilisée est l'immunofluorescence.

Le médicament est traité avec du sérum luminescent, ce qui vous permet de déterminer les complexes immuns au microscope à fluorescence.

L'un des tests sérologiques les plus sensibles pour diagnostiquer la syphilis est le TPHA. La méthode a une grande précision. Il est souvent utilisé pour vérifier le diagnostic pendant la grossesse lorsque d'autres tests peuvent donner un résultat faussement positif.

Caractéristiques du sérodiagnostic

Pour diagnostic sérologique de la syphilis dans ses différentes périodes prélever du sang d'une veine. Il est recommandé d'effectuer l'analyse à jeun, cela réduit le nombre de résultats faussement positifs. Le tube doit être stérile. Lors de tests express, dans certains cas, le sang est prélevé sur un doigt.

En cas de suspicion, le liquide céphalo-rachidien est prélevé pour le sérodiagnostic. Pour son analyse, les mêmes méthodes sont utilisées que dans l'étude du sang.

Pour diagnostiquer la syphilis, passez un examen complet dans notre clinique.