Serologinė sifilinės infekcijos diagnozė. Šiuolaikiniai laboratoriniai sifilio diagnostikos metodai ir algoritmai. Kaip interpretuoti sifilio testus

Borelijų, leptospirų ir treponemų taksonomija ir jų sukeliamų ligų pavadinimai.

Šeima: Spirochaetaceae

Gentis: Borrelia

Rūšis: B. recurrentis yra epideminės pasikartojančios karštinės sukėlėjas.

Gentis: Treponema

Rūšis: T. pallidum – sifilio sukėlėjas

Gentis: Leptospira

Rūšis: L. Icterohaemorrhagiae – leptospirozės sukėlėjas

Mikroskopinė sifilio diagnozė.

Tamsaus lauko mikroskopija: prieš tyrimą paimamas audinių skystis iš opos dugno arba taškinio limfmazgio. Paruošiamas susmulkinto lašo preparatas: lašas tiriamosios medžiagos užlašinamas ant stiklelio vidurio, lašas uždengiamas dengiamuoju stiklu, kad nebūtų oro burbuliukų. Teigiamas rezultatas: mikroskopu atskleidžiamos treponemos su vienodomis 8-12 didelių garbanų. Jiems būdingi sklandūs sukamieji-transliaciniai, švytuokliniai ir lenkimo judesiai.Dažant pagal Romanovsky-Giemsa: sifilio sukėlėjas nudažytas šviesiai rausva spalva, kitos treponemos - rausvai violetine spalva.

Reakcijos, naudojamos sifilio serodiagnostikai. Bendrosios kiekvieno iš jų charakteristikos.

RSK(Wassermann reakcija): Komponentai: 1 sistema – paciento serumas, diagnostinis, komplementas, ICN; 2 sistema – hemolizinis serumas ir avies eritrocitų suspensija. Paruoškite 1 sistemą, inkubuokite 37 C 1 valandą. Įdėkite antrą sistemą, inkubuokite 37 C 1 valandą. Teigiamas rezultatas - hemolizės nebuvimas.

RPGA: Komponentai: ICN, paciento serumas, eritrocitų diagnostika. Paruošiami serumo skiedimai, pridedama diagnostinė medžiaga ir dedama į termostatą 24 valandoms 37 C temperatūroje. Grindys. rezultatas: skėtis.

ELISA: Komponentai: paciento serumas, diagnostinis preparatas, konjugatas, chromogeninis substratas. Diagnostinis tirpalas pririšamas prie plokštelės plastikinio šulinėlio ir pridedamas praskiestas serumas, konjugatas ir substratas. Grindys. rezultatas: substrato spalvos pasikeitimas.

Netiesioginis RIF: AG – Treponema pallidum (Nicholso padermė) užtepama ant stiklelio. Tepinėliai džiovinami oru ir fiksuojami acetone 5 minutes. Paciento serumas išsekinamas nepatogeniškų Reiterio padermės treponemų suspensija arba atskiedžiamas santykiu 1:200, po to tepamas paruoštais preparatais. Laikyti drėgnoje kameroje 35 C temperatūroje 30 minučių (1 fazė). Tepinėliai 10 minučių plaunami ICN ir džiovinami. Tada ant preparato užlašinamas lašas fluorescencinio anti-žmogaus globulino serumo ir 30 minučių inkubuojamas drėgnoje kameroje kambario temperatūroje (2 fazė). Tepinėliai nuplaunami cheminiais chemikalais ir išdžiovinami. Žiūrima pro fluorescencinį mikroskopą. Teigiama reakcija: žalias švytėjimas.

Flokuliacijos reakcija ant stiklo: Kraujo plazma arba nekaitintas serumas keletą minučių maišomas su nespecifiniu lipidų antigenu ant stiklelio. Teigiamas rezultatas: esant mažam padidinimui, matomos padidėjusios antigeno dalelės (flokuliacijos).

Sifilio serodiagnostika naudojant RPGA.

Komponentai: ICN, paciento serumas, eritrocitų diagnostika. Paruošiami serumo skiedimai, pridedama diagnostinė medžiaga ir dedama į termostatą 24 valandoms 37 C temperatūroje. Grindys. rezultatas: skėtis.

Sifilio serodiagnostika naudojant ELISA.

Komponentai: paciento serumas, diagnostinis preparatas, konjugatas, chromogeninis substratas. Diagnostinis tirpalas pririšamas prie plokštelės plastikinio šulinėlio ir pridedamas praskiestas serumas, konjugatas ir substratas. Grindys. rezultatas: substrato spalvos pasikeitimas.

Sifilio serodiagnostika naudojant RSC.

Wasserman reakcija: galite naudoti paciento kraujo serumą ir smegenų skystį (neurosifilio stadijoje). Diagnostikai naudojamas treponeminis arba kardiolipino antigenas. Komponentai: 1 sistema – paciento serumas, diagnostinis, komplementas, ICN; 2 sistema – hemolizinis serumas ir avies eritrocitų suspensija. Paruoškite 1 sistemą, inkubuokite 37 C 1 valandą. Įdėkite antrą sistemą, inkubuokite 37 C 1 valandą. Teigiamas rezultatas - hemolizės nebuvimas.

Leptospirozės mikrobiologinės diagnostikos metodai.

Bakterioskopinis metodas: paruoškite susmulkinto lašo preparatą, ištirkite jį tamsaus lauko mikroskopu: judantys ploni siūlai su lenkimais galuose (antrinės garbanos) - segtuko arba S raidės pavidalu.

Bakteriologinis metodas: medžiaga – kraujas, šlapimas, smegenų skystis. Medžiaga pasėjama (3–5 mėgintuvėliai) vandens serumo terpėje, Fletcher terpėje ir Kartof terpėje. Inkubuoti iki 30 dienų 28-30C temperatūroje CO 2 atmosferoje. Norint nustatyti Leptospira augimą, praėjus 10 dienų po sėjos, iš mėgintuvėlio paimama medžiaga, paruošiamas susmulkinto kalio preparatas ir tiriamas tamsaus lauko mikroskopu. Iš mėgintuvėlio, kuriame buvo aptiktas Leptospira augimas, perpilkite į 3 mėgintuvėlius su šviežia maistine terpe, inkubuokite 7-10 dienų, temperatūra ta pati. Diferenciacijai atliekamas bikarbonato tyrimas, nustatomas hemolizinis aktyvumas ir fosfolipazės aktyvumas. Nustatyta pagal antigeninę struktūrą, naudojant agliutinuojančius serumus.

Biologiniai tyrimai: Jūrų kiaulytėms į pilvaplėvės ertmę įšvirkščiama 1 g tiriamosios medžiagos ir stebima mėnesį, stebint temperatūrą ir kūno svorį, geltos atsiradimą ir kraujavimą, taip pat gyvūno mirtį.

Serologinis tyrimas: AT serume atsiranda nuo 2 savaičių. Naudojamos mikroagliutinacijos ir Leptospira lizės reakcijos. Paciento serumas skiedžiamas du kartus nuo 1:100 iki 1:1600. Į mėgintuvėlių seriją įpilama 0,2 ml praskiesto serumo ir toks pat kiekis gyvos Leptospira padermių kultūros. Inkubuokite 1 valandą 37 C temperatūroje. Iš kiekvieno mėgintuvėlio turinio paruošiamas susmulkinto lašo preparatas ir tiriamas mikroskopu. AT pirmųjų praskiedimų serume sukelia lizę – Leptospira ištirpimą arba granuliuotą patinimą. Vėlesniuose skiedimuose - agliutinacija - aglomeruojasi vorų pavidalu. Teigiama reakcija praskiedus 1:400 ar daugiau turi diagnostinę reikšmę.

1. Potekajevas N.N., Frigo N.V., Almazova A.A., Lebedeva G.A. Sifilio epidemiologija šiuolaikinėmis sąlygomis. Klinikinis dermatologija Ir venerologija. 2015;1:22-34.
2. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH. Laboratorinė sifilio diagnostika ir tyrimų interpretavimas. Clin Microbiol Rev 1995 sausis;1-21.
3. Coles AC. Spirochaeta pallida. Tyrimo ir aptikimo metodai, ypač naudojant tamsaus pagrindo apšvietimą. Br Med 1909;1:1117-1120.
4. Kellogg, DSJr, Mothershed SM. Imunofluorescencinis aptikimas Blyški treponema:apžvalga. JAMA 1969;107:938-941.
5. Mullis KB. Specifinė DNR sintezė in vitro per polimerazės katalizuojamą grandininę reakciją. Meth Enzimolis. 1987;155:335.
6. Centurion-Lara A. Treponema pallidum aptikimas naudojant jautrią atvirkštinės transkriptazės PGR. J Clin Microbiol. 1997;35;6:1348-1352.
7. Wassermann A, Neisser A, Brück C. Eine serodiagnostische Reaktion bei Syphilis. Dtsch Med Wochenschr. 1906;32:745-746.
8. Pangborn MC. Kardiolipinas ir jo taikymas chemiškai išvalytame antigene sifilio serodiagnostikai. Proc N Y valstybinis docentas Visuomenės sveikatos lab. 1946;26(1):26-29.
9. Pangborn MC. Kardiolipino sudėties tyrimas. Fed Proc. 1946;5(1 Pt 2):149.
10. Dmitrijevas G.A., Bragina E.E. Šiuolaikiniai sifilio laboratorinės diagnostikos metodai. I dalis Dermatologijos žurnalas. 1996;2:29-33.
11. Dmitrijevas G.A., Bragina E.E. Šiuolaikiniai sifilio laboratorinės diagnostikos metodai. II dalis. Dermatologijos žurnalas. 1996;3:33-38.
12. Nespecifiniai teigiami serologinių tyrimų dėl sifilio rezultatai. Šiuolaikinių serologinių reakcijų kiekybinės modifikacijos. Gairės. M. 1990 m.
13. 2001 m. kovo 26 d. Rusijos Federacijos Sveikatos apsaugos ministerijos įsakymas Nr. 87 „Dėl serologinės sifilio diagnostikos tobulinimo“.
14. Rusijos dermatovenerologų draugija. Federalinės klinikinės sifiliu sergančių pacientų gydymo rekomendacijos. M. 2013 m.
15. Lyakhovas V.F., Borisenko K.K., Potekajevas N.S. ir kt., Treponemijai būdingos imunoglobulinemijos dinamika ankstyvose sifilio formose. Dermatologijos žurnalas. 1990;8:38-42.
16. Kiseleva G.A., Tkachev V.K., Bednova V.N. ir kt. Trijų su fermentais susietų imunosorbentų tyrimų sistemų, skirtų M klasės imunoglobulinams aptikti sifilio sukėlėjui, jautrumo ir specifiškumo lyginamasis tyrimas. Dermatologijos žurnalas. 2000;4:6-10.
17. Ermatova F.A. Specifinių M klasės imunoglobulinų nustatymas ankstyvai sifilio diagnostikai (klinikinis ir laboratorinis tyrimas): dis. ...kand. medus. Sci. M. 2014 m.
18. Mardanly S.G., Arsenyeva V.A., Aniskova I.N., Zhigalenka A.R. Buitinė tyrimų sistema „Line-Blot Syphilis-IgM“, skirta IgM antikūnams prieš Treponema pallidum nustatyti linijinio imunoblotavimo būdu. Klinikinė dermatologija ir venerologija. 2013;5:35-38.
19. Guseva S.N. IgM-RIFAbs testo naudojimas tiriant nėščias moteris dėl sifilinės infekcijos aktyvumo. Rusijos odos ir venerinių ligų žurnalas. 2004;6:60-63.
20. Ovčinikovas N.M., Bednova V.N., Delectorsky V.V. Laboratorinė lytiniu keliu plintančių ligų diagnostika. M. 1987 m.
21. Lee K, Park H, Roh EY, Shin S, Park KU, Park MH, Song EY. Serumo apibūdinimas su prieštaringais rezultatais atlikus atvirkštinės sekos atranką dėl sifilio. Biomed Res Int. 2013;2013:269-347.
22. Binnikeris MJ. Koks algoritmas turėtų būti naudojamas sifiliui tikrinti? Curr Opin Infect Dis. 2012 m. vasario mėn.;25(1):79-85.
23. Castro A, Jost H, Cox D, Fakile Y, Kikkert S, Tun Y, Zaidi A, Park M. Devynių treponeminių sifilio tyrimų analitinio suderinimo lygio palyginimas ir galimos pasekmės atrankos algoritmui. BMJ Open. 2013 rugsėjo 19 d.;3(9).
24. Park IU, Chow JM, Bolan G, Stanley M, Shieh J, Schapiro JM. Sifilio atranka naudojant treponeminį imuninį tyrimą: nesuderinamų serologinių rezultatų ir klinikinio valdymo pasekmių analizė. J Infect Dis. 2011 lapkritis;204(9):1297-1304.

Rusijos nacionalinis mokslinių tyrimų medicinos universitetas pavadintas. N.I. Pirogova

Vaikų ligų fakulteto Dermatovenerologijos katedra

Pranešimas tema: Laboratoriniai sifilio diagnostikos metodai

Baigė: Studentas 440 grupėse

Pediatrijos fakultetas

Seranovas Igoris Anatoljevičius

Ne treponeminiai tyrimai

Treponeminiai tyrimai

Serologinių reakcijų kompleksas

Wassermano reakcija

Imunofluorescencinė reakcija

Imuninės adhezijos reakcija

Treponema pallidum imobilizacijos reakcija

Imunofluorescencinė reakcija adsorbuojant Treponema pallidum

Hemagliutinacijos reakcija

Susietas imunosorbento tyrimas

Polimerazės grandininė reakcija

Visi šiandien naudojami serologinio tyrimo metodai sąlygiškai skirstomi į du tipus: netreponeminis, kvalifikacinis (NTT)- ir treponeminis, kurie patvirtina ligos sukėlėjo (TT) buvimą.Sifilis yra labai kompleksinis, klinikinis vaizdas labai neryškus ir ne visada pasireiškia, todėl teisingai diagnozei nustatyti vienu metu atliekami keli serologiniai tyrimai. Vizualiai patvirtinus Treponema pallidum buvimą paimtame mėginyje (naudojant mikroskopą), diagnozė nustatoma nedelsiant, o kiti tyrimai atliekami retai.

Ne treponeminiai tyrimai(testai) - NTT yra vadinamieji atrankiniai tyrimai, jie nėra labai brangūs ir jų pagalba galima ištirti gana daug pacientų, o daugelio tyrimų rezultatai paruošiami labai greitai. Tačiau esant klaidingai ligos eigai, esant mažam jautrumui, atlikti tokius tyrimus yra nepraktiška, 100% rezultato nebus įmanoma gauti.

Kai diriguoja netreponeminis tyrimai tiriamoje medžiagoje, aptinkami antikūnai, kurie reaguoja su kardiolipinas – lecitino antigenas. Vienas pirmųjų bandymų buvo Bordet-Giangu imunologine reakcija pagrįstas metodas, kai antigenas buvo naujagimio, mirusio nuo sifilio, kepenų ekstraktas. Šiandien, atliekant tokius tyrimus, antigenas yra lecitinas, cholesterolis ir kardiolipinas.

Užsienyje, ypač JAV, naudojami 4 ne treponeminiai metodai, kurie skirstomi į du tipus: metodai, leidžiantys vizualiai nustatyti reakcijos rezultatus (RPR ir TRUST) ir mikroskopinio rezultatų nuskaitymo metodai (USR). ir VDRL).

Ne treponeminiai diagnostikos metodai apima netiesioginius susietas imunosorbentų tyrimas naudojant kardiolipiną kaip antigeną. Mūsų šalyje ir NVS šalyse ne treponeminiai tyrimai yra plazmos reakcija su inaktyvuotas serumas (MR) ir reakcija, su kuria susijęs komplimentas kardiolipinas (CLP).

Visi ne treponeminiai diagnostikos metodai yra labai panašūs vienas į kitą. Visi jie turi mažą kainą ir yra lengvai ir greitai atliekami. Tokio tipo tyrimai netinka ligai nustatyti pirminėje stadijoje ir slaptai pasireiškiančiam sifiliui (latentinė sifilio forma). Antikūnai, nustatyti ne treponemos testu, atsiranda praėjus maždaug mėnesiui po užsikrėtimo treponema. Daugeliu atvejų pacientams, kurie buvo gydomi nuo pirminės sifilio stadijos, netreponeminiai tyrimai duoda neigiamą rezultatą maždaug metus.

Treponeminiai tyrimai(testai) - TT yra daug brangesni, jų technika labai sudėtinga ir jie naudojami patvirtinti teigiamus rezultatus, gautus atliekant netreponeminius tyrimus.

Kaip minėjome aukščiau treponeminiai metodai naudojamas patvirtinti Treponema pallidum buvimą organizme, kuris buvo nustatytas naudojant ne treponemos testus. Jie taip pat atliekami, jei atlikti tyrimai neduoda teigiamo rezultato, tačiau klinikoje kyla įtarimų dėl ligos. Visiškai išgydžius sifilį, daugiau nei 80% išgydytų asmenų teigiama reakcija atliekant treponemos tyrimus dar kelerius metus, o kai kuriems – visą likusį gyvenimą. Remiantis tuo, treponeminiai testai nenaudojami profilaktiniams tyrimams žmonėms, baigusiems visą gydymo kursą.

Moksliniai tyrimai imunologijos ir molekulinės biologijos srityse nuolat tęsiasi ir, pasitelkus naujausias technologijas, atsiranda vis daugiau naujų sifilio diagnozavimo tyrimų, kurie tvirtai užima lyderio pozicijas. Vienas iš šių praktikoje tvirtai įsitvirtinusių testų yra fermentinis imunologinis tyrimas (ELISA), ir daugelis tyrimo metodų yra kūrimo stadijose.

Tai serologinių tyrimų kompleksas Rusijoje atliekamos sudėtingos serologinės reakcijos:

standartinės serologinės reakcijos –

komplemento fiksavimo reakcija (Wassermann reakcija),

reakcija su treponeminiu antigenu ir reakcija su kardiolipinu;

grupės treponeminės reakcijos -

imunofluorescencinė reakcija (RIF)

imuninės adhezijos reakcija (IAR);

rūšiai būdingos baltymų treponeminės reakcijos –

Treponemos imobilizacijos reakcija (TRIT),

RIF – abs ir jo variantai (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

pasyvi treponeminė hemagliucinacijos reakcija (TPHA).

Jei serologinės reakcijos naudojamos kartu, tai leis nustatyti ligą ankstyvosiose ligos stadijose.

Wassermann reakcija yra komplemento fiksavimo metodas. Reakcijai atlikti kaip antigenai naudojami ekstraktai, pagaminti iš Treponema pallidum (specifiniai antigenai) ir kardiolipino, ekstrakto, pagaminto iš galvijų širdies raumens (nespecifiniai antigenai). Kuo daugiau blyškios treponemos stebima tiriamoje medžiagoje, tuo didesnis ligos laipsnis ir laipsnis vertinamas pliusais:

1) - neigiamas; 2) + abejotinas; 3) ++ silpnai teigiamas; 4) +++ teigiamas; 5) ++++ labai teigiamas.

Wassermano reakcija (komplemento fiksavimo reakcija) būtinai atliekamos kartu su nuosėdų reakcijomis - Sachs - Vitebsk ir Kahn. Imunologinis reakcijų pobūdis paprastai yra toks pat kaip Wasserman reakcijos, tačiau šioms reakcijoms reikia daugiau prisotintų antigenų, kurie, reaguodami su serumo reaginais, išskiria didesnes nuosėdas. Seronegatyvus pirminis sifilis diagnozuojamas, jei standartiniai serologiniai tyrimai duoda neigiamą rezultatą. Sifilio aptikimas Wasserman reakcija yra veiksminga seropozityviam antriniam sifiliui, čia tyrimo rezultatai yra 100% teisingi. Tretinėje aktyvaus sifilio stadijoje rezultatai teisingi daugiau nei pusei pacientų, o paskutinėmis sifilio stadijomis, kai pažeidžiami vidaus organai ir sistemos, – pusei pacientų. U sergančiųjų ankstyvu įgimtu sifiliu, serologiniai tyrimai beveik visada duoda teigiamą rezultatą, o sergantiesiems vėlyvu įgimtu sifiliu – beveik 80 proc.

RSC principas yra tas, kad sifiliu sergančių pacientų kraujo serume esantys reaginai turi savybę jungtis su įvairiais antigenais. Gauti kompleksai rūšiuoja į reakciją įvestą komplementą. Reagino-antigeno-komplemento kompleksui nurodyti naudojama hemolizinė sistema (avies eritrocitų mišinys su hemoliziniu serumu). Esant kompleksui, raudonieji kraujo kūneliai nusėda. Kas pastebima plika akimi. Hemolizės sunkumą gydytojas nurodo šiais mygtukais: stipriai teigiamas 4+, teigiamas 3+, silpnai teigiamas 2+ arba 1+ ir neigiamas. Be kokybinio šių reakcijų įvertinimo, yra ir kiekybinis, kuris svarbus diagnozuojant tam tikras sifilio stadijas ir stebint gydymo veiksmingumą.

Imunofluorescencinė reakcija (RIF) yra pagrįstas antikūnų, paženklintų specialiu fluorescenciniu tirpalu, aptikimu, siekiant identifikuoti antikūnus, susijusius su antigenu violetiniuose kvarco lempos spinduliuose. Ši reakcija yra labai jautri ir padeda nustatyti ligą pirminėje seronegatyvaus sifilio stadijoje. Šis tyrimas taip pat padeda nustatyti ligą pacientams, kurių liga yra latentinė arba vėlyvos stadijos. Yra keletas tokių reakcijų tipų, o labiausiai vertinamas yra RIF-200, su kuriuo galima aptikti latentinį sifilį ir atpažinti nespecifinius DCS rezultatus. Tačiau, nepaisant aukštų RIFa-200 rodiklių, diagnozė nustatoma atlikus visus klinikinius tyrimus. RIF netinka stebėti pacientų po pilno gydymo, nes gydymo etape jis gana lėtai neigiamas.

Imuninės adhezijos reakcija (IAR). Ši reakcija pagrįsta treponemų, kuriuos jautrina serumas, sukibimu su raudonaisiais kraujo kūneliais ir jų nusodinimu. Rezultatai vertinami pagal šią lentelę:

Neigiamas – 0–20 %

Abejotina - 21-30%;

Silpnai teigiamas - 31-50%;

Teigiama - 51-100%.

Visais atžvilgiais RIP labai panašus į RIF ir RIT. Ši reakcija atliekama keliais atvejais, jei sifilis nepatvirtintas remiantis klinikiniais požymiais, anamneze, laboratoriniais tyrimais, siekiant kontroliuoti ligą po reikiamo gydymo ir patvirtinti DCS rezultatus.

Treponema pallidum imobilizacijos reakcija (TRE) Patekę į aplinką, kurioje yra tiriamojo serumo imobilizinų ir aktyvaus komplemento, blyški treponema praranda judrumą. Tuo ir pagrįsta ši reakcija. RIT yra labai specifinis ir naudojamas latentiniam sifiliui atpažinti, nėščiosioms, kurioms įtariamas sifilis, diagnozuoti ir daugeliui kitų atvejų, kai standartiniai serologiniai tyrimai nėra labai specifiniai. Didelis šios reakcijos trūkumas yra tai, kad ji yra labai brangi ir jos įgyvendinimas yra labai sunkus procesas. Rezultatai skaitomi pagal Treponema pallidum imobilizacijos procentą:

Neigiamas - iki 20%; - abejotinas -21-30%; - silpnai teigiamas -31-50%; -teigiamas -51-100%.

Dėl to, kad imobilizinai kraujyje atsiranda vėliau nei kiti antikūnai, reakcija tampa teigiama šiek tiek vėliau nei su kitomis reakcijomis. Pradinėje infekcijos stadijoje, kaip taisyklė, stebima neigiama arba silpnai teigiama reakcija. Nors antrinėje sifilio stadijoje imobilizinų atsiradimas paciento kraujo serume pastebimas iki 60%, reakcija teigiama beveik pusei tirtųjų. Antrinės sifilio stadijos atkryčio atveju RIT teigiamas beveik 90% pacientų. Tretinėje sifilio vystymosi stadijoje, kai pažeisti vidaus organai, įskaitant nervų sistemą, kai Wasserman reakcija duoda neigiamų rezultatų, Treponema pallidum imobilizacijos reakcija yra teigiama beveik 100% pacientų. Ankstyvoje įgimto sifilio stadijoje reakcija yra teigiama beveik visiems pacientams, o vėlyvoje įgimto sifilio stadijoje - beveik 100% pacientų. Seropozityvus latentinis sifilis patvirtinamas tik po RIT, kuris atliekamas gavus teigiamus kitų serologinių tyrimų rezultatus. RIT nenaudojamas pacientų ligai kontroliuoti kuriems buvo suteiktas reikiamas gydymas.

Imunofluorescencinis absorbcijos testas su Treponema pallidum (FTA-ABS).Jei reakcija atliekama pacientui, sergančiam sifiliu ir negydytam, tada ši reakcija visada duoda teigiamą rezultatą. Taip pat yra didelė tikimybė aptikti infekciją naudojant FTA-ABS pačioje ligos pradžioje.. Reakcija pasižymi dideliu jautrumu ir specifiškumu. Diagnozuojant latentinį sifilį ir tais atvejais, kai jau buvo atlikti keli tyrimai ir jie davė neigiamą rezultatą, tačiau klinika praneša apie infekciją Treponema pallidum, tokiais atvejais diagnozė dažnai nustatoma remiantis FTA-ABS rezultatais. Žodžiu, praėjus savaitei po treponema pallidum patekimo į organizmą, pradeda gamintis specifiniai IgM antikūnai, kurie ilgainiui nustoja atsirasti ir po 2 metų jau nebeaptinkami. Siekiant suprasti, ar siūlomas gydymas yra efektyvus, atliekami specialūs tyrimai šių antikūnų specifiškumui nustatyti. Šiandien yra keletas tokių tyrimų, tačiau jie yra per brangūs, todėl daugumai pacientų šie tyrimai neatliekami.

Hemagliutinacijos reakcija, kuri aptinka specifinius antikūnus prieš Treponema pallidum (mikro-RPGA). Šiai reakcijai treponemai tarnauja kaip antigenas, todėl ši reakcija yra labai specifinė ir daugeliu atvejų duoda tikrų rezultatų.

Su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas (ELISA) vienas specifiškiausių sifiliui diagnozuoti. Šiandien dažniausiai naudojama netiesioginė ELISA versija. Šio tyrimo metodo privalumai akivaizdūs: ne per didelė kaina, paprastas įgyvendinimas, gana didelis rezultato tikslumas, šios analizės pagalba galima nustatyti sifilį ankstyvoje stadijoje, greitai gauti rezultatus.

Pagrinde imunoblotavimo metodas yra su fermentais susietas imunosorbentinis tyrimas, kuris derinamas su elektroforeze. Tai vienas specifiškiausių tyrimų ir jo pagalba patvirtinama sifilio infekcija.

Polimerazės grandininė reakcija (specifinis tyrimo metodas) atliekami latentinio sifilio infekcijos diagnozei nustatyti. Atliekant PGR, patogenas randamas tiriamojoje medžiagoje net pirminėje ligos stadijoje. Aptikta genetinė medžiaga padalijama naudojant DNR ir taip aptikti patogeną tampa labai paprasta. Sergant neurosifiliu, kai labai sunku nustatyti infekciją atliekant kitus tyrimus dėl labai mažo jautrumo, su įgimtu sifiliu, esant pirminei seronegatyvaus sifilio stadijai ir diagnozuojant ŽIV infekuotus žmones, PGR yra būtinas. Studijuoti cerebrospinalinis skystis sergant sifiliu, jis atliekamas, jei yra klinikinių nervų sistemos pažeidimų ankstyvoje ligos stadijoje, su latentine forma ir visada prieš pradedant gydymą. Šis tyrimas taip pat skiriamas pacientams, sergantiems neurosifiliu vėlesnėse sifilio stadijose ir latentinėje formoje. Klinikinėje laboratorijoje tiriama citozė, baltymų kiekis, Pandey ir Nonne-Apelt reakcijos. Serologinėse laboratorijose atliekama Wasserman reakcija, Lange reakcija, RIF, RIFyu, RIFts, RIT.

Svetainėje pateikiama informacinė informacija tik informaciniais tikslais. Ligų diagnostika ir gydymas turi būti atliekami prižiūrint specialistui. Visi vaistai turi kontraindikacijų. Būtina konsultacija su specialistu!

Kreiptis į venerologą – kam to reikia?

Anamnezė– diagnozei nustatyti reikalingos informacijos rinkimas: pacientų skundai, informacija apie tam tikrus seksualinio gyvenimo aspektus ir kontaktai su įtariamaisiais venerinės ligos asmenų. Anksčiau sirgusios lytiškai plintančios ligos, informacija apie jų gydymo rezultatus. Visa ši informacija leidžia gydančiam gydytojui sutelkti dėmesį į labiausiai tikėtinas ligas, privertusias pacientą kreiptis į specializuotą pagalbą.

Sekė klinikinis tyrimas. Kruopščiausiai tiriamos lytinių organų gleivinės ir oda, išangės sritis, burnos gleivinė. Didesnis dėmesys skiriamas išorinių limfmazgių grupių palpacijai ir nustatytų infekcinių nekrozinių židinių palpacijai. Dažnai šiame etape sifilio diagnozė gali būti nustatyta su gana didele tikimybe.

Tačiau norint nustatyti galutinę diagnozę, taip pat stebėti proceso dinamiką gydymo metu, būtina atlikti laboratoriniai tyrimai.

Laboratorinis sifilio patvirtinimas – kas tai apima ir kaip tai daroma?

2. Tiesioginė fluorescencinė reakcija. Prieš atliekant šį diagnostikos metodą, biomedžiaga apdorojama specialiu fluorescenciniu serumu, dėl kurio prie Treponema pallidum paviršiaus prisitvirtina specifiniai imuniniai kompleksai. Dėl šios reakcijos, mikroskopuojant apdorotą biomedžiagą fluorescenciniu mikroskopu, Treponema pallidum atrodo švytinti ir elegantiška.

3. PGR ( polimerazės grandininė reakcija). Šis metodas leidžia nustatyti infekcinio agento DNR, todėl jo buvimas paciento kūne tampa akivaizdus.

Kaip nustatomi imunologiniai sifilio požymiai ir kodėl juos reikia nustatyti?
Visa grupė imunologinių parametrų tyrimų, skirtų infekcinėms ligoms diagnozuoti, vadinama serologija. Šiais laikais yra daug serologinės diagnostikos metodų, tačiau juos visus vienija tai, kad diagnozuojant biomedžiaga yra paciento kraujas. Kalbant apie sifilio diagnozę, visus serologinius tyrimus galima suskirstyti į treponeminius – aptinkančius antikūnus prieš Treponema pallidum struktūrinius elementus ir netreponeminius – nustatančius imunologinius pokyčius, susijusius su bakterijos veiklos pasekmėmis.

Nereponeminė serologija
1. Mikroprecipitacijos reakcija (VDRL).Šiuo tyrimu paciento kraujyje aptinkami antikūnai, kuriuos imuninė sistema gamina prieš Treponema pallidum pažeistas ląsteles. Šis testas pasižymi dideliu patikimumu, bet mažu specifiškumu. Faktas yra tai, kad kraujyje gali būti aptinkamų antikūnų nuo daugelio ligų ir patologinių būklių. Todėl šis tyrimas naudojamas tik kaip ligos patikra, nustatant įtariamą ligą. Tačiau šis metodas turi neįkainojamą pranašumą diagnozuojant gydymo veiksmingumą. Jei pacientas išgydomas, nuosėdų mikroreakcija su kardiolipino antigenu tampa neigiama, priešingai nei kitų serologinių tyrimų tipų, kurie ilgą laiką gali duoti teigiamą rezultatą.

2. Wassermano reakcija.Šis tyrimas yra susijęs su komplemento fiksavimo reakcija – vienu iš imunologinio atsako įgyvendinimo mechanizmų.
Testas įvertintas teigiamai ( ne kryžiuose, kaip daugelis galvoja!). Ir reakcija yra neigiama ( dėl apžiūros nurodomas minusas), abejotina ( po tyrimo nurodomas 1 plius +), silpnai teigiamas ( dėl apžiūros nurodomi 2 pliusai ++), teigiama reakcija ( dėl apžiūros nurodomi 3 pliusai +++), labai teigiama reakcija ( dėl apžiūros nurodomi 4 pliusai ++++).

Treponeminė serologija
1. Imunofluorescencinė reakcija (RIF).Šio tipo tyrimai aptinka antikūnus, kuriuos gamina užsikrėtusio žmogaus imuninė sistema. Norėdami tai padaryti, paciento kraujo serumas sąveikauja su konkrečiu vaistu, kuriame yra antikūnų. Sumaišius paciento kraujo plazmą ir reagentą su specifiniais antikūnais, paženklintais specialia fluorescencine medžiaga, jie jungiasi. Tyrimas atliekamas naudojant specialų fluorescencinį mikroskopą.

2. Su fermentais susietas imunosorbentinis tyrimas (ELISA). Apie šią analizę verta pakalbėti plačiau. Kadangi jis yra pagrindinis nustatant daugumą infekcinių ligų. Metodas pagrįstas selektyvia, labai specifine antigeno ir antikūno reakcija. Viena iš šios analizės ypatybių yra ta, kad ji gali padėti nustatyti įvairių klasių antikūnus ( IgA IgM IgG ). Taip pat svarbu šios analizės galimybė nustatyti aptiktų antikūnų kiekį. Dėl to, nustačius antikūnų tipą ir kiekybinį jo komponentą, galima padaryti nemažai išvadų apie ligos trukmę, proceso dinamiką, patogeno aktyvumą ir paciento imuninę sistemą. Dėl to ši analizė pasirodė esanti nepakeičiama diagnozuojant infekcines ligas, taip pat stebint ligos dinamiką gydymo fone.

3. Pasyvi hemagliutinacijos reakcija (RPHA).Ši reakcija pagrįsta imunologiškai sukeltu raudonųjų kraujo kūnelių sukibimu. Šios reakcijos mechanizmas yra tas, kad iš anksto paruošiami raudonieji kraujo kūneliai, kurių paviršiuje fiksuojami Treponema pallidum baltyminiai komponentai. Todėl sumaišius su kraujo plazma, kurioje yra antikūnų prieš treponemą, raudonieji kraujo kūneliai sulimpa – kraujas iš raudono virsta granuliuotu. Hemagliutinacijos reakcija tampa teigiama praėjus 4 savaitėms po užsikrėtimo. Po sėkmingo sifilio gydymo ši reakcija gali išlikti teigiama visą gyvenimą.

Iš to, kas pasakyta, aišku, kad diagnostikos, gydymo ir gydymo efektyvumo stebėjimas yra gana sudėtingas ir daug laiko reikalaujantis darbas. O pacientui, neturinčiam medicininio išsilavinimo, neįmanoma suprasti tyrimo tikslų ir rezultatų. Tačiau mes stengsimės prieinama forma pateikti imunologinių pokyčių dinamiką skirtingose ​​sifilio stadijose, laboratorinius rodiklius, kurie atskleidžia šiuos pokyčius.

Taigi - šiek tiek teorijos. Po infekcijos imuninės ląstelės pirmą kartą susiduria su Treponema pallidum. Identifikavusios jį kaip svetimą mikroorganizmą, imunokompetentingos ląstelės pradeda aktyviai formuoti imuninį atsaką. Antikūnai, specifiškai veikiantys Treponema pallidum klasę IgM, paciento kraujyje aptinkami praėjus 7 dienoms po užsikrėtimo, antikūnų IgG susintetinti vėliau – po 4 sav. Šios 2 antikūnų klasės skiriasi savo struktūra, tačiau diagnozei svarbu tai IgM sintezuojamas ankstyvosiose infekcijos stadijose ( tai rodo neseniai įvykusią infekciją) arba esant dideliam infekcijos aktyvumui. IgG aptikimas rodo tik stabilaus imuniteto šiai infekcijai susidarymą, tik antikūnų titro analizė laikui bėgant leidžia įvertinti ligos išgydymą ar infekcijos aktyvumą. Antilipidai ( nespecifinis) imunologiniai kompleksai aktyviai sintetinami praėjus 4 - 5 savaitėms po užsikrėtimo.
Svarbu, kad klinikinių sifilio pasireiškimų laikotarpiu kraujyje būtų aptikti Treponema pallidum specifiniai antikūnai, pvz. IgM, ir klasė IgG (visų antikūnų). Svarbus gydymo proceso parametras yra antikūnų kiekybinių parametrų pokytis. Tinkamai parinktas gydymas prisideda prie staigaus koncentracijos sumažėjimo IgM, stabilaus lygio fone IgG– šie rodikliai rodo stabilaus imuniteto Treponema pallidum susidarymą, kai sumažėja jo infekcinis aktyvumas. Būtina atkreipti dėmesį į tai, kad specifiniai antikūnai prieš treponemą gali išlikti žmogaus kraujyje daugelį metų, duodami teigiamų rezultatų kai kurių tipų tyrimuose.

Kaip interpretuoti serologinių tyrimų rezultatus?

Reagin testai naudojami masiniam pacientų patikrinimui dėl sifilio. Paprastai jie atliekami kaip profilaktinių tyrimų dalis. Tokie tyrimai yra kiekvienoje gydymo įstaigoje ir atliekami greitai. Atsakymas paprastai paruošiamas po 30–40 minučių.

Teigiamas rezultatas reagino reakcijų metu nėra diagnozės nustatymo kriterijus. Reikia papildomų specifinių rūšių tyrimų.

Labiausiai paplitęs atrankos metodas yra Wasserman reakcija. Jis naudoja kardiolipiną ir treponeminį antigeną. Jei kraujo serume nėra reaginų, įvyks avių raudonųjų kraujo kūnelių hemolizė, kuri pridedama kaip indikatorius.

Esant reaginams, visi raudonieji kraujo kūneliai nusodins, tokiu atveju reakcija laikoma teigiama.

Reaguokite šiais atvejais:

• kitos ligos, kurių sukėlėjai savo antigenine struktūra yra panašūs į blyškiąją spirochetą
• nėštumas
• onkologinės ligos
• vartojant salicilatus
• miokardinis infarktas
• techninės klaidos analizės metu

Jei reagino reakcija teigiama, atliekami specifiniai serologiniai tyrimai. Jie taip pat skiriami, jei kyla abejonių dėl neigiamo rezultato.

Treponeminiai antigenai naudojami atliekant tokius tyrimus kaip RIF, RIT, ELISA, RPGA, hemadsorbcijos reakcija kietoje fazėje. Šios reakcijos yra pagrįstos antigeno-antikūnų kompleksų susidarymu ir skiriasi jų nustatymo metodu. Dažniausiai naudojama imunofluorescencinė reakcija.

Vaistas yra apdorojamas liuminescenciniu serumu, kuris leidžia nustatyti imuninius kompleksus liuminescenciniu mikroskopu.

Viena jautriausių serologinių reakcijų diagnozuojant sifilį yra RPHA. Metodas yra labai tikslus. Jis dažnai naudojamas diagnozei patikrinti nėštumo metu, kai kiti tyrimai gali duoti klaidingai teigiamą rezultatą.

Serodiagnostikos ypatybės

Dėl serologinė sifilio diagnozė įvairiais jo laikotarpiais kraujas paimamas iš venos. Analizę rekomenduojama atlikti tuščiu skrandžiu, tai sumažina klaidingų teigiamų rezultatų skaičių. Mėgintuvėlis turi būti sterilus. Atliekant greituosius tyrimus, kai kuriais atvejais kraujas imamas iš piršto.

Įtarus, serodiagnostikai imamas smegenų skystis. Jai analizuoti naudojami tie patys metodai kaip ir kraujo tyrimams.

Norėdami diagnozuoti sifilį, atlikite išsamų tyrimą mūsų klinikoje.