אבחון סרולוגי של זיהום עגבת. שיטות מעבדה מודרניות ואלגוריתמים לאבחון של עגבת. כיצד לפרש בדיקות עגבת

טקסונומיה של בורליה, לפטוספירה וטרפונמה, ושמות המחלות הנגרמות מהן.

משפחה: Spirochaetaceae

סוג: בורליה

מינים: B. recurrentis - הגורם לקדחת חוזרת של מגיפה.

סוג: טרפונמה

מינים: T. pallidum - הגורם הגורם לעגבת

סוג: לפטוספירה

מינים: L. Icterohaemorrhagiae - הגורם הגורם ללפטוספירוזיס

אבחון מיקרוסקופי של עגבת.

מיקרוסקופיה של שדה כהה: לפני המחקר, נוזל רקמה נלקח מתחתית הכיב או נקודה נקודתית של בלוטת הלימפה. מכינים הכנה של טיפה מרוסקת: מורחים טיפה מחומר הבדיקה על אמצע שקף הזכוכית, הטיפה מכוסה בכיסוי כיסוי כדי שלא יהיו בועות אוויר. תוצאה חיובית: טרפונמות עם 8-12 תלתלים גדולים אחידים נמצאות במיקרוסקופיה. הם מאופיינים בתנועות סיבוביות-תרגום חלקות, דמויות מטוטלת וכיפוף.כאשר מוכתמים לפי רומנובסקי-גימסה: הגורם הסיבתי של עגבת הופך לוורוד חיוור, טרפונמות אחרות הופכות לאדמדם-סגול.

תגובות המשמשות בסרודיאגנוזה של עגבת. מאפיינים כלליים של כל אחד מהם.

RSK(תגובת ווסרמן): רכיבים: מערכת 1 - סרום מטופל, אבחון, משלים, CNI; מערכת 2 - סרום המוליטי ותרחיף של אריתרוציטים של כבשים. מערכת 1 מוכנה, דגירה ב-37C למשך שעה אחת. מתווספת מערכת שנייה, דגירה ב-37C למשך שעה. תוצאה חיובית היא היעדר המוליזה.

RPGA: רכיבים: CNI, סרום החולה, אבחון אריתרוציטים. מכינים דילולים בסרום, מוסיפים דיאגנוסטיקום, בתרמוסטט למשך 24 שעות 37C. קוֹמָה. תוצאה: מטריה.

אליסה: רכיבים: סרום מטופל, דיאגנוסטיקום, מצומד, מצע כרומוגני. הדיאגנוסטיקום מחובר לפלסטיק של באר הטבליה, מוסיפים את הסרום המדולל, המצומד והמצע. קוֹמָה. תוצאה: שינוי בצבע המצע.

RIF עקיף: AG מוחל על שקף זכוכית - טרפונמה חיוורת (זן ניקולס). המריחות מיובשות באוויר ומקובעות באציטון למשך 5 דקות. הסרום של המטופל מתרוקן עם תרחיף של טרפונמות לא פתוגניות של זן Reiter או מדולל 1:200, ולאחר מכן מוחל על התכשירים המוכנים. שמור בתא לח ב-35C למשך 30 דקות (שלב אחד). המריחות נשטפות במשך 10 דקות ב-ICN ומייבשים. לאחר מכן, מורחים על התכשיר טיפה של סרום ניאון נגד גלובולין אנושי ומודגרת בתא לח בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות (שלב 2). המריחות נשטפות עם ICN ומייבשות. נצפה תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי. תגובה חיובית: זוהר ירוק.

תגובת פלוקולציה על זכוכית: פלזמת דם או סרום לא מחומם מעורבב עם אנטיגן שומני לא ספציפי במשך מספר דקות על שקף זכוכית. תוצאה חיובית: חלקיקי אנטיגן מוגדלים (פלוקולטים) נראים בהגדלה נמוכה.

סרודיאגנוזיס של עגבת באמצעות RPHA.

רכיבים: CNI, סרום מטופל, אבחון אריתרוציטים. מכינים דילולים בסרום, מוסיפים דיאגנוסטיקום, בתרמוסטט למשך 24 שעות 37C. קוֹמָה. תוצאה: מטריה.

סרודיאגנוזיס של עגבת באמצעות ELISA.

רכיבים: סרום מטופל, דיאגנוסטיקום, מצומד, מצע כרומוגני. הדיאגנוסטיקום מחובר לפלסטיק של באר הטבליה, מוסיפים את הסרום המדולל, המצומד והמצע. קוֹמָה. תוצאה: שינוי בצבע המצע.

Serodiagnosis של עגבת באמצעות RSK.

תגובתו של וסרמן: ניתן להשתמש בסרום הדם של המטופל ובנוזל השדרה (בשלב הנוירוסיפיליס). כדיאגנוסטיקום - אנטיגן טרפונמל או קרדיוליפין. רכיבים: מערכת 1 - סרום מטופל, אבחון, משלים, CNI; מערכת 2 - סרום המוליטי ותרחיף של אריתרוציטים של כבשים. מערכת 1 מוכנה, דגירה ב-37C למשך שעה אחת. מתווספת מערכת שנייה, דגירה ב-37C למשך שעה. תוצאה חיובית היא היעדר המוליזה.

שיטות לאבחון מיקרוביולוגי של לפטוספירוזיס.

שיטה בקטריוסקופית: הכינו תכשיר של טיפה מרוסקת, למדו אותה במיקרוסקופ שדה כהה: חוטים דקים ניתנים להזזה עם עיקולים בקצוות (תלתלים משניים) - בצורת סוגר או האות S.

שיטה בקטריולוגית: חומר - דם, שתן, נוזל מוחי. החומר מחוסן (3-5 מבחנות) במדיום מים-סרום, מדיום פלטשר, תפוח אדמה. דגירה עד 30 יום ב-28-30C באווירה של CO 2. כדי לזהות את הצמיחה של לפטוספירה, 10 ימים לאחר החיסון, לוקחים חומר מהמבחנה, מכינים תכשיר של אשלגן כתוש ולומדים במיקרוסקופ של שדה כהה. מהמבחנה שבה נמצאה גידול לפטוספירה, הם עוברים תת-תרבות ל-3 מבחנות עם מצע תזונתי טרי, מודגרות במשך 7-10 ימים, הטמפרטורה זהה. לצורך בידול, מתבצעת בדיקת ביקרבונט, פעילות המוליטית, פעילות פוספוליפאז נקבעת. מזוהה על ידי מבנה אנטיגני באמצעות סראים מצגרים.

מחקר ביולוגי: חזירי ניסיונות מוזרקים תוך צפק עם 1 גרם מחומר הבדיקה ונבדקים במשך חודש, תוך ציון הטמפרטורה ומשקל הגוף, הופעת צהבת ושטפי דם, כמו גם מותה של בעל החיים.

מחקר סרולוגי: AT בסרום מופיעים משבועיים. השתמש בתגובה של microagglutination ותמוגה של לפטוספירה. הסרום של המטופל מדולל פעמיים מ-1:100 עד 1:1600. 0.2 מ"ל של סרום מדולל ואותה כמות של תרבית חיה של זני Leptospira מתווספים למספר מבחנות. דגירה במשך שעה אחת ב-37C. מכינים תכשיר טיפה מרוסקת מתכולת כל מבחנה ומבוצעת במיקרוסקופ. נוגדנים בסרום של הדילולים הראשונים גורמים לתמוגה - התמוססות או נפיחות גרגירית של לפטוספירה. בדילולים הבאים - אגלוטינציה - מצברים בצורת עכבישים. לערך אבחוני יש תגובה חיובית בדילול של 1:400 ומעלה.

1. Potekaev N.N., Frigo N.V., Almazova A.A., Lebedeva G.A. אפידמיולוגיה של עגבת בתנאים מודרניים. קלינית דֶרמָטוֹלוֹגִיָה ו מין. 2015;1:22-34.
2. Larsen SA, Steiner BM, Rudolph AH. אבחון מעבדה ופרשנות בדיקות לעגבת. Clin Microbiol Revינואר 1995; 1-21.
3. קולס AC. Spirochaeta pallida.שיטות בדיקה וגילוי, במיוחד באמצעות תאורת הקרקע הכהה. בר מד 1909;1:1117-1120.
4. קלוג, DSJr, Mothershed SM. זיהוי אימונופלורסנט של Treponema pallidum: ביקורת. JAMA 1969;107:938-941.
5. Mullis KB. סינתזה ספציפית של DNA במבחנה באמצעות תגובת שרשרת מזורזת פולימראז. מת אנזימול. 1987;155:335.
6. Centurion-Lara A. זיהוי של Treponema pallidum על ידי PCR רגיש של transcriptase הפוכה. J Clin Microbiol. 1997;35;6:1348-1352.
7. Wassermann A, Neisser A, Brück C. Eine serodiagnostische Reaktion bei Syphilis. Dtsch Med Wochenschr. 1906;32:745-746.
8. Pangborn MC. קרדיוליפין ויישומו באנטיגן מטוהר כימית לסרודיאגנוזה של עגבת. Proc N Y State Assoc Health Lab. 1946;26(1):26-29.
9. Pangborn MC. מחקר על הרכב הקרדיוליפין. FedProc. 1946;5(1 Pt 2):149.
10. דמיטרייב G.A., Bragina E.E. שיטות מודרניות לאבחון מעבדה של עגבת. חלק א' עלון דרמטולוגיה. 1996;2:29-33.
11. דמיטרייב G.A., Bragina E.E. שיטות מודרניות לאבחון מעבדה של עגבת. חלק שני. עלון דרמטולוגיה. 1996;3:33-38.
12. תוצאות חיוביות לא ספציפיות של בדיקות סרולוגיות לעגבת. שינויים כמותיים של בדיקות סרולוגיות מודרניות. הנחיות. מ' 1990.
13. צו של משרד הבריאות מס' 87 של הפדרציה הרוסית מ-26 במרץ 2001 "על שיפור האבחנה הסרולוגית של עגבת".
14. החברה הרוסית של רופאי עור. הנחיות קליניות פדרליות לטיפול בחולים עם עגבת.מ' 2013.
15. Lyakhov V.F., Borisenko K.K., Potekaev N.S., וחב' דינמיקה של אימונוגלובולינמיה ספציפית לטרפונמה בצורות מוקדמות של עגבת. עלון דרמטולוגיה. 1990;8:38-42.
16. Kiseleva G.A., Tkachev V.K., Bednova V.N., וחב' מחקר השוואתי של הרגישות והספציפיות של שלושה מבחני אימונו של אנזימים שנועדו לזהות אימונוגלובולינים מסוג M לגורם הסיבתי של עגבת. עלון דרמטולוגיה. 2000;4:6-10.
17. Ermatova F.A. קביעת אימונוגלובולינים מסוג M ספציפי לאבחון מוקדם של עגבת (מחקר קליני ומעבדה): Dis. … cand. דבש. מדעים. מ' 2014.
18. Mardanly S.G., Arsenyeva V.A., Aniskova I.N., Zhigalenko A.R. מערכת בדיקה מקומית "Line-Blot Syphilis-IgM" לאיתור נוגדני IgM ל-Treponema pallidum על ידי אימונובלוטינג ליניארי דרמטולוגיה קלינית ורפואת מין. 2013;5:35-38.
19. גוסבה ס.נ. השימוש בבדיקת IgM-RIFabs בבדיקת נשים בהריון לפעילות של זיהום עגבת. כתב עת רוסי למחלות עור ומין. 2004;6:60-63.
20. Ovchinnikov N.M., Bednova V.N., Delektorsky V.V. אבחון מעבדה של מחלות מין. מ' 1987.
21. Lee K, Park H, Roh EY, Shin S, Park KU, Park MH, Song EY. אפיון של סרה עם תוצאות לא מתאימות מבדיקת רצף הפוך לאיתור עגבת. Biomed Res Int. 2013;2013:269-347.
22. ביניקר MJ. באיזה אלגוריתם יש להשתמש כדי לבדוק עגבת? Curr Opin Infect Dis. 2012 פברואר;25(1):79-85.
23. קסטרו A, Jost H, Cox D, Fakile Y, Kikkert S, Tun Y, Zaidi A, Park M. השוואה של רמת ההסכמה האנליטית של תשעה מבחני טרפונמל לעגבת והשלכות אפשריות על אלגוריתם ההקרנה. BMJ פתוח. 2013 19 בספטמבר; 3(9).
24. Park IU, Chow JM, Bolan G, Stanley M, Shieh J, Schapiro JM. סקר לאיתור עגבת עם ה-Treponemal immunoassay: ניתוח של תוצאות סרולוגיות שונות והשלכות על ניהול קליני. J Infect Dis. 2011 Nov;204(9):1297-1304.

האוניברסיטה הלאומית למחקר רפואי ברוסיה. נ.י. פירוגובה

המחלקה לדרמטונרולוגיה, הפקולטה לרפואת ילדים

דיווח בנושא: שיטות מעבדה לאבחון עגבת

הושלם על ידי: תלמיד 440 בקבוצות

הפקולטה לרפואת ילדים

סראנוב איגור אנטוליביץ'

מחקרים לא טרפונמאליים

לימודי טרפונמל

מתחם לביצוע תגובות סרולוגיות

תגובת וסרמן

תגובה אימונופלואורסצנטית

תגובת הידבקות חיסונית

תגובת אימוביליזציה של Treponema pallidum

Treponema pallidum ספיחה תגובה אימונופלואורסצנטית

תגובת ההמגלוטינציה

בדיקת אימונוסורבנט מקושר

תגובת שרשרת פולימראז

כל שיטות המחקר הסרולוגיות המשמשות כיום מחולקות על תנאי לשני סוגים: לא טרפונמל, כשיר (NTT) - ו treponemal, אשר מאשרים את נוכחות הפתוגן (TT).עגבת קשה מאוד, המרפאה מטושטשת מאוד ולא תמיד באה לידי ביטוי, לכן, נעשה שימוש בכמה בדיקות סרולוגיות בבת אחת כדי לבצע את האבחנה הנכונה. עם אישור חזותי של נוכחות של טרפונמה חיוורת בחומר שנלקח (באמצעות מיקרוסקופ), האבחנה נעשית מיד, ורק לעתים רחוקות מבוצעות בדיקות אחרות.

מחקרים לא טרפונמאליים(בדיקות) - NTT הם מה שנקרא מחקרי סקר, הם לא מאוד יקרים ובעזרתם ניתן לבחון מספר די גדול של חולים, יתרה מכך, התוצאות של בדיקות רבות מוכנות מהר מאוד. אבל עם מהלך שקרי של המחלה, עם רגישות נמוכה, בדיקות כאלה אינן מעשיות, ולא ניתן להשיג תוצאה של 100%.

בעת ניצוח לא טרפונמלבדיקות בחומר הנבדק, מתגלים נוגדנים המגיבים איתם cardiolipin - אנטיגן לציטין. אחת הבדיקות הראשונות הייתה שיטה המבוססת על התגובה האימונולוגית של Bordet-Jangu, שבה תמצית הכבד של ילד בן יומו שמת מעגבת פעלה כאנטיגן. כיום, כאשר עורכים בדיקות כאלה, האנטיגן הוא לציטין, כולסטרול וקרדיוליפין.

בחו"ל, בפרט בארה"ב, נעשה שימוש ב-4 שיטות לא-טרפונמאליות, המתחלקות לשני סוגים: שיטות המאפשרות לקבוע חזותית את תוצאות התגובה (RPR ו-TRUST) ושיטות לקריאה מיקרוסקופית של התוצאות (USR). ו-VDRL).

שיטות אבחון שאינן טרפונמאליות כוללות עקיפות בדיקת אימונוסורבנט מקושרתשימוש בקרדיוליפין כאנטיגן. בארצנו ובמדינות חבר העמים, התגובה של פלזמה עם סרום לא פעיל (MR)והתגובה שבה המחמאה קשורה קרדיוליפין (RCC).

כל שיטות האבחון שאינן טרפונמאליות דומות מאוד זו לזו. לכולם עלות נמוכה, הם פשוטים ומהירים לביצוע. בדיקות מסוג זה אינן מתאימות לאיתור המחלה בשלב הראשוני ולעגבת המתרחשת בסתר (צורה סמויה של עגבת). נוגדנים שנקבעים בבדיקה שאינה טרפונמלית מופיעים כחודש לאחר ההדבקה בטרפונמה. ברוב המקרים, בחולים שטופלו בשלב הראשוני של עגבת, בדיקות לא-טרפונמל שליליות למשך כשנה.

לימודי טרפונמל(בדיקות) - TTs הרבה יותר יקרים, הטכניקה מאוד מורכבת והם משמשים לאשר את התוצאות החיוביות שהתקבלו במחקרים שאינם טרפונמאליים.

כפי שאמרנו למעלה שיטות טרפונמלמשמש לאישור נוכחות של טרפונמה חיוורת בגוף, אשר זוהתה באמצעות בדיקות שאינן טרפונמאליות. הם מבוצעים גם אם הבדיקות שבוצעו לא נתנו תוצאה חיובית, אך המרפאה מציעה נוכחות של מחלה. לאחר הריפוי המלא של העגבת, ליותר מ-80% מהנרפאים יש תגובה חיובית בעת ביצוע בדיקות טרפונמל למשך מספר שנים נוספות, ולחלקם - לכל החיים. בהתבסס על זה, בדיקות טרפונמל אינן משמשות לבדיקות מניעתיות אצל אנשים שסיימו קורס מלא של טיפול.

המחקר המדעי בתחום האימונולוגיה והביולוגיה המולקולרית נמשך ללא הרף ובעזרת הטכנולוגיות החדישות ביותר צצות עוד ועוד בדיקות חדשות לאבחון עגבת, אשר נמצאות בראש ובראשונה. אחד המבחנים הללו, שהתבסס היטב בפועל - בדיקת אנזים חיסונית (ELISA), ושיטות מחקר רבות נמצאות בפיתוח.

זֶה מתחם בדיקות סרולוגיות, המתבצע ברוסיה, כולל התנהלות מקיפה של תגובות סרולוגיות:

תגובות סרולוגיות סטנדרטיות -

תגובת קיבוע משלים (תגובת וסרמן),

תגובה עם אנטיגן טרפונמל ותגובה עם קרדיוליפין;

תגובות טרפונמל קבוצתיות -

תגובה חיסונית פלואורסצנטית (RIF)

תגובת הידבקות חיסונית (RIP);

תגובות טרפונמל לחלבון ספציפיות למין -

תגובת אימוביליזציה של טרפונם (RIT),

RIF - שרירי הבטן והגרסאות שלו (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

תגובה של המגלוצינציה פסיבית של טרפונמים (TPHA).

אם נעשה שימוש בבדיקות סרולוגיות בשילוב, הדבר יאפשר לזהות את המחלה בשלבים המוקדמים של המחלה.

תגובת וסרמן היא שיטה לקיבוע משלים. לביצוע התגובה משתמשים בתמציות כאנטיגן, העשויות מטרפונמות חיוורות (אנטיגנים ספציפיים) וקרדיוליפין היא תמצית שהוכנה משריר הלב של שור (אנטיגנים לא ספציפיים). ככל שנצפים יותר טרפונמות חיוורות בחומר הבדיקה, כך גדלה מידת המחלה ומעריכים את התואר עם פלוסים:

1) - שלילי; 2) + ספק; 3) ++ חיובי חלש; 4) +++ חיובי; 5) ++++ חיובי מאוד.

תגובת וסרמן (תגובת קיבוע משלים)בלי להיכשל, הם מבוצעים יחד עם תגובות משקעים - זקס - ויטבסקי וקהן. האופי האימונולוגי של התגובות זהה באופן כללי לזה של תגובת וסרמן, אך תגובות אלו דורשות יותר אנטיגנים רוויים, אשר, כאשר הם מגיבים עם reagins בסרום, נותנים משקעים גדולים יותר. עגבת ראשונית סרונגטיבית מאובחנת אם הבדיקות הסרולוגיות הסטנדרטיות שליליות. זיהוי של עגבת תגובת וסרמן יעילה בעגבת שניונית סרו-חיובית, כאן תוצאות הבדיקה נכונות ב-100%. בשלב השלישוני של עגבת פעילה התוצאות נכונות ביותר ממחצית מהחולים, ובשלבים האחרונים של עגבת, עם פגיעה באיברים ומערכות פנימיות, התוצאות נכונות במחצית מהחולים. בְּ חולים עם עגבת מולדת מוקדמת, בדיקות סרולוגיות נותנות תוצאה חיובית כמעט תמיד, ובחולים עם עגבת מולדת מאוחרת - בכמעט 80% מהמקרים.

העיקרון של RSK הוא שהריאגינים המצויים בסרום הדם של חולי עגבת הם בעלי יכולת להיכנס לתרכובות עם אנטיגנים שונים. הקומפלקסים המתקבלים ממיינים את המשלים המוכנס לתגובה. מערכת המוליטית (תערובת של אריתרוציטים של ראם עם סרום המוליטי) משמשת כדי לציין את קומפלקס reagin-antigen-complement. בנוכחות המתחם, אריתרוציטים משקעים. מה שמורגש בעין בלתי מזוינת. חומרת המוליזה מסומנת על ידי הרופא עם המפתחות: חיובי חד 4+, חיובי 3+, חיובי חלש 2+ או 1+ ושלילי. בנוסף להערכה איכותית של תגובות אלו, ישנה גם הערכה כמותית, שחשובה באבחון שלבים מסוימים של עגבת ובניטור יעילות הטיפול.

תגובה אימונופלואורסצנטית (RIF)הוא מבוסס על זיהוי של נוגדנים המסומנים בתמיסת פלואורסצנטית מיוחדת על מנת לזהות נוגדנים הקשורים לאנטיגן בקרניים הסגולות של מנורת קוורץ. תגובה זו רגישה מאוד ועוזרת לזהות את המחלה בשלב הראשוני של עגבת סרוננגטיבית. בדיקה זו היא גם שעוזרת לזהות את המחלה בחולים בהם המחלה סמויה או בשלבים מאוחרים. ישנם מספר סוגים של תגובות כאלה, ו-RIF-200 הוא המוערך ביותר, בעזרתו ניתן לזהות עגבת סמויה ולזהות תוצאות לא ספציפיות של CSR. אבל, למרות השיעורים הגבוהים של RIF-200, האבחנה נעשית לאחר ביצוע כל הבדיקות הקליניות. RIF אינו מתאים לניטור חולים לאחר טיפול מלא, שכן הוא די שלילי לאט בשלב הטיפול.

תגובת הידבקות חיסונית (RIP). תגובה זו מבוססת על הידבקות של טרפונמות, אשר רגישות על ידי נסיוב, לאריתרוציטים ולמשקעים שלהם. התוצאות מוערכות לפי הטבלה הבאה:

שלילי - 0-20%

מפוקפק-21-30%;

חיובי חלש - 31-50%;

חיובי-51-100%.

מכל הבחינות, RIP דומה מאוד ל-RIF ול-RIT. תגובה זו מתבצעת במספר מקרים, אם עגבת לא מאושרת על בסיס ביטויים קליניים, אנמנזה, בדיקות מעבדה, כדי לשלוט במחלה לאחר קבלת הטיפול הדרוש ולאשר את תוצאות ה-CSR.

תגובת אימוביליזציה של Treponema pallidum (RIT)פעם אחת בסביבה שבה יש אימוביליזינים של סרום הבדיקה ומשלים פעיל, טרפונמות חיוורות מאבדות את הניידות שלהן. זה הבסיס לתגובה זו. RIT מאוד ספציפי ומשמש לאיתור עגבת סמויה, לאבחון נשים בהריון בהן יש חשד לעגבת, ומקרים רבים נוספים בהם בדיקות סרולוגיות סטנדרטיות אינן ספציפיות. החיסרון הגדול של תגובה זו הוא שהיא יקרה מאוד וזה תהליך מאוד מסובך לביצוע. התוצאות נקראות בהתאם לאחוז הנתונים של immobilization של treponemas חיוור:

שלילי - עד 20%; -מוטל בספק -21-30%; -חיובי חלש -31-50%; -חיובי -51-100%.

בשל העובדה שאימוביליזינים מופיעים בדם מאוחר יותר מנוגדנים אחרים, התגובה הופכת חיובית מעט מאוחר יותר מאשר עם תגובות אחרות. בשלב הראשוני של ההדבקה, ככלל, נצפית תגובה שלילית או חיובית חלשה. בשלב המשני של עגבת, למרות שהופעת אימוביליזינים בסרום הדם של המטופל נצפתה עד 60%, התגובה חיובית בכמעט מחצית מהנבדקים. עם הישנות של השלב המשני של עגבת, RIT חיובי בכמעט 90% מהחולים. בשלב השלישוני של התפתחות עגבת, עם פגיעה באיברים פנימיים, כולל מערכת העצבים, כאשר תגובת וסרמן נותנת תוצאות שליליות, תגובת האימוביליזציה של טרפונמה חיוורת חיובית בכמעט 100% מהחולים. בשלב מוקדם של עגבת מולדת, לתגובה יש תוצאה חיובית כמעט בכל החולים, ובשלב מאוחר של עגבת מולדת - בכמעט 100% מהחולים.עגבת סמויה סרו-חיובית מאושרת רק לאחר RIT, המתבצעת לאחר קבלת תוצאות חיוביות במהלך בדיקות סרולוגיות אחרות. RIT אינו משמש לשליטה במחלה בחוליםשקיבל את הטיפול הדרוש.

מבחן אימונופלואורסצנטי ספיגת Treponema pallidum (FTA-ABS).אם התגובה מתבצעת עבור חולה שיש לו עגבת ולא טופל, אז התגובה הזו תמיד נותנת תוצאה חיובית. קיימת גם סבירות גבוהה לגילוי זיהום באמצעות FTA-ABS ממש בתחילת המחלה.. לתגובה יש רגישות וסגוליות רבה. לאבחון של עגבת סמויה ובמקרים בהם כבר בוצעו מספר בדיקות והן הראו תוצאה שלילית, אך המרפאה מדברת על זיהום בטרפונמה חיוורת, במקרים כאלו האבחנה נעשית לרוב על סמך תוצאות FTA-ABS . ממש שבוע לאחר כניסת טרפונמה חיוורת לגוף, מתחילים להיווצר נוגדני IgM ספציפיים, אשר בסופו של דבר מפסיקים להופיע ולאחר שנתיים אינם מזוהים יותר. על מנת להבין האם הטיפול המוצע יעיל, מתבצעות בדיקות מיוחדות הקובעות את הספציפיות של נוגדנים אלו. יש היום כמה בדיקות כאלה, אבל הן יקרות מדי לביצוע, ולכן בדיקות אלו אינן מבוצעות לרוב המטופלים.

תגובת ההמגלוטינציה, הקובע נוגדנים ספציפיים לטרפונמה חיוורת (מיקרו-TPHA). עבור תגובה זו, טרפונמות משמשות כאנטיגן, ולכן תגובה זו היא מאוד ספציפית ונותנת תוצאות אמיתיות ברוב המקרים.

בדיקת אנזים חיסונית (ELISA)אחד הספציפיים ביותר לאבחון של עגבת. כיום, הגרסה העקיפה של ELISA משמשת לרוב. היתרונות של שיטת מחקר זו ברורים: לא יותר מדי עלות, קלות יישום, דיוק גבוה של התוצאה, בעזרת ניתוח זה ניתן לזהות עגבת בשלב מוקדם, תוצאות מהירות.

בבסיס שיטת אימונובטינגטמון אנזים immunoassay, אשר משולב עם אלקטרופורזה. זוהי אחת הבדיקות הספציפיות ביותר ובעזרתה, זיהום עגבת מאושר.

תגובת שרשרת פולימראז (שיטת מחקר ספציפית)בוצע כדי לקבוע אבחנה במהלך הסמוי של זיהום עגבת. בעת ביצוע PCR, הפתוגן נמצא בחומר הבדיקה, גם בשלב הראשוני של המחלה. החומר הגנטי שזוהה מחולק על ידי DNA וכך קל מאוד לזהות את הפתוגן. בנוירוסיפיליס, כאשר קשה מאוד לזהות זיהום בעת עריכת בדיקות אחרות עקב רגישות נמוכה מאוד, בעגבת מולדת, בשלב הראשוני של עגבת סרונגטטיבית ולצורך אבחנה בנגועים ב-HIV, PCR הוא הכרחי. לימוד נוזל מוחיעם עגבת, זה מתבצע אם יש נגעים קליניים של מערכת העצבים בשלב מוקדם של המחלה, עם צורה סמויה, ותמיד לפני תחילת הטיפול. כמו כן, ניתוח זה נקבע לחולים עם נוירוסיפיליס בשלבים מאוחרים של עגבת ועם צורה סמויה. המעבדה הקלינית עורכת מחקר של ציטוזה, תכולת חלבון, תגובות Pandey ו-Nonne-Apelt. במעבדות סרולוגיות מתבצעות תגובת וסרמן, תגובת לאנג, RIF, RIFyu, RIFts, RIT.

האתר מספק מידע התייחסות למטרות מידע בלבד. אבחון וטיפול במחלות צריכים להתבצע תחת פיקוחו של מומחה. לכל התרופות יש התוויות נגד. דרוש ייעוץ מומחה!

פנייה לרופא ונראולוג - למה זה נחוץ?

אנמנזה- איסוף מידע הדרוש לזיהוי האבחנה: תלונות מטופלים, מידע על היבטים מסוימים של חיי המין ומגעים עם חשודים מחלות המועברות במגע המיניאנשים. מחלות קודמות המועברות במגע מיני, מידע על תוצאות הטיפול בהן. כל המידע הזה מאפשר לרופא המטפל להתרכז במחלות הסבירות ביותר שגרמו לחולה לפנות לעזרה מיוחדת.

בא אחריו בדיקה קלינית. הקרום הרירי והעור של איברי המין, אזור פי הטבעת ורירית הפה נתונים לבדיקה זהירה ביותר. תשומת לב מוגברת מוקדשת למישוש של הקבוצות החיצוניות של בלוטות הלימפה, מישוש של מוקדים נמקיים זיהומיים מזוהים. לעתים קרובות בשלב זה, האבחנה של עגבת יכולה להיעשות במידה רבה למדי של הסתברות.

עם זאת, על מנת לבצע אבחנה סופית, כמו גם לעקוב אחר הדינמיקה של התהליך במהלך הטיפול המתמשך, יש צורך לבצע בדיקות מעבדה.

אישור מעבדה של עגבת - מה זה כולל וכיצד זה נעשה?

2. תגובת פלואורסצנטי ישירה.שיטת אבחון זו קודמת לעיבוד של החומר הביולוגי עם סרום פלואורסצנטי מיוחד, אשר מוביל להתקשרות של קומפלקסים חיסוניים ספציפיים על פני השטח של טרפונמה חיוורת. כתוצאה מתגובה זו, כאשר מיקרוסקופ של החומר הביולוגי המעובד במיקרוסקופ פלואורסצנטי, טרפונמה חיוורת נראית זוהרת ואלגנטית.

3. PCR ( תגובת שרשרת פולימראז). שיטה זו מאפשרת לך לזהות את ה-DNA של גורם זיהומי, מה שמבהיר את נוכחותו בגוף המטופל.

כיצד מתגלים סימנים אימונולוגיים של עגבת, ומדוע צריך לגלות אותם?
כל קבוצת המחקרים של פרמטרים אימונולוגיים לצורך אבחון מחלות זיהומיות נקראת סרולוגיה. כיום קיימות שיטות אבחון סרולוגיות רבות, אך כולן מאוחדות בכך שהחומר הביולוגי באבחון הוא הדם של המטופל. בהתייחס לאבחון של עגבת, ניתן לחלק את כל הבדיקות הסרולוגיות לטרפונמל - גילוי נוגדנים נגד האלמנטים המבניים של טרפונמה חיוורת ולא טרפונמל - חושפים שינויים אימונולוגיים הקשורים להשלכות של פעילות חיידקית.

סרולוגיה לא טרפונמלית
1. מיקרו תגובת משקעים (VDRL).מחקר זה מזהה בדמו של המטופל נוגדנים המיוצרים על ידי מערכת החיסון כנגד תאים שניזוקו על ידי טרפונמה חיוורת. לבדיקה זו יש אמינות גבוהה, אך ספציפיות נמוכה. העובדה היא שנוגדנים הניתנים לזיהוי יכולים להיות נוכחים בדם במחלות ובמצבים פתולוגיים רבים. לכן, בדיקה זו משמשת רק כבדיקת מחלה, המגלה חשד למחלה. עם זאת, לשיטה זו יתרון שלא יסולא בפז באבחון יעילות הטיפול. אם החולה נרפא, מיקרו-תגובת המשקעים עם אנטיגן הקרדיוליפין הופכת לשלילית, בניגוד לסוגי מחקר סרולוגיים אחרים, שיכולים לתת תוצאה חיובית לאורך זמן.

2. תגובת וסרמן.מחקר זה קשור לתגובת קיבוע המשלים - אחד המנגנונים ליישום התגובה האימונולוגית.
המבחן מוערך בפלוסים ( לא בצלבים, כפי שרבים מאמינים!). והתגובה שלילית כתוצאה מהסקר ציין מינוס), מוטל בספק ( כתוצאה מהסקר, מצוין 1 פלוס +), חיובי חלש ( כתוצאה מהבדיקה, 2 פלוסים מצוינים ++), תגובה חיובית ( כתוצאה מהבדיקה מצוינים 3 פלוסים +++), תגובה חיובית חדה ( כתוצאה מהבדיקה מצוינים 4 פלוסים ++++).

סרולוגיה טרפונמל
1. תגובה אימונופלואורסצנטית (RIF).סוג זה של מחקר מזהה נוגדנים המיוצרים על ידי מערכת החיסון של אדם נגוע. לשם כך מתבצעת האינטראקציה של סרום הדם של המטופל ותכשיר ספציפי המכיל נוגדנים. לאחר ערבוב פלזמת הדם של המטופל והריאגנט עם נוגדנים ספציפיים המסומנים בחומר ניאון מיוחד, הם נקשרים. המחקר מתבצע באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי מיוחד.

2. בדיקת אנזים אימונו (ELISA).ניתוח זה ראוי ליותר פרטים. מכיוון שהוא העיקרי בזיהוי רוב המחלות המדבקות. השיטה מבוססת על תגובה סלקטיבית מאוד של אנטיגן-נוגדן. אחת התכונות של ניתוח זה היא שניתן להשתמש בו כדי לזהות נוגדנים מקבוצות שונות ( IgA IgM IgG ). חשובה גם היכולת של ניתוח זה לקבוע את כמות הנוגדנים שזוהתה. כתוצאה מכך, קביעת סוג הנוגדנים והמרכיב הכמותי שלו מאפשרת לנו להסיק מספר מסקנות לגבי משך המחלה, דינמיקת התהליך, פעילות הפתוגן ומערכת החיסון של החולה. כתוצאה מכך, ניתוח זה התברר כחיוני באבחון מחלות זיהומיות, כמו גם מעקב אחר הדינמיקה של המחלה על רקע טיפול מתמשך.

3. התגובה של המאגלוטינציה פסיבית (RPHA).תגובה זו מבוססת על צבירה אימונולוגית של אריתרוציטים. המנגנון של תגובה זו הוא כי אריתרוציטים מוכנים מראש, שעל פני השטח שלהם קבועים מרכיבי החלבון של טרפונמה חיוורת. לכן, כאשר מערבבים אותם עם פלזמת דם המכילה נוגדנים לטרפונמה, אריתרוציטים נצמדים זה לזה - הדם הופך מאדום לגרגרי. תגובה חיובית להמגלוטינציה הופכת 4 שבועות לאחר ההדבקה. לאחר טיפול מוצלח בעגבת, תגובה זו יכולה להישאר חיובית לאורך כל החיים.

מהאמור לעיל ברור שעניין האבחון, מעקב אחר יעילות הטיפול והריפוי הוא עבודה די סבוכה וגוזלת זמן. ולא ייתכן שמטופל שאין לו השכלה רפואית יבין את מטרות המחקר ותוצאותיו. עם זאת, ננסה להציג בצורה נגישה את הדינמיקה של שינויים אימונולוגיים בשלבים שונים של עגבת, ואינדיקטורים מעבדתיים החושפים שינויים אלו.

אז - קצת תיאוריה. לאחר ההדבקה, תאי החיסון נתקלים לראשונה ב-treponema pallidum. זיהויו כמיקרואורגניזם זר, תאים בעלי יכולת חיסונית מתחילים היווצרות פעילה של תגובה חיסונית. נוגדנים ספציפיים ל-treponema pallidum IgM, נמצאים בדם החולה 7 ימים לאחר ההדבקה, נוגדנים IgGמסונתז מאוחר יותר - לאחר 4 שבועות. 2 מחלקות הנוגדנים הללו שונות במבנה, אך חשוב לאבחנה זאת IgMמסונתז בשלבים המוקדמים של זיהום ( מה המשמעות של זיהום לאחרונה?) או בנוכחות פעילות זיהום גבוהה. זיהוי IgG רק מצביע על היווצרות חסינות יציבה לזיהום זה, רק סדרה של ניתוחים של טיטר הנוגדנים בדינמיקה מאפשרת לנו להעריך את הריפוי של המחלה או את פעילות הזיהום. אנטי ליפיד ( לא ספציפי) קומפלקסים אימונולוגיים מסונתזים באופן פעיל 4-5 שבועות לאחר ההדבקה.
חשובה היא העובדה שבתקופת הביטויים הקליניים של עגבת בדם, מתגלים נוגדנים ספציפיים לטרפונמה חיוורת. IgM, והכיתה IgG (סך הנוגדנים). פרמטר חשוב בתהליך הטיפול הוא השינוי בפרמטרים הכמותיים של נוגדנים. טיפול שנבחר נכון תורם לירידה חדה בריכוז IgM, על רקע רמה יציבה IgG- אינדיקטורים אלה מצביעים על חסינות יציבה שנוצרה בפני טרפונמה חיוורת על רקע ירידה בפעילותו הזיהומית. יש צורך לשים לב לעובדה כי נוגדנים ספציפיים לטרפונמה יכולים להישאר בדם אנושי במשך שנים רבות, ונותנים תוצאות חיוביות בכמה סוגים של מחקרים.

כיצד לפרש את תוצאות מחקרים סרולוגיים?

בדיקות ריאגין משמשות לסריקה המונית של חולים לאיתור עגבת. הם מבוצעים בדרך כלל כחלק מבדיקות מניעתיות. בדיקות כאלה זמינות בכל מתקן רפואי ומתבצעות במהירות. התשובה בדרך כלל מוכנה לאחר 30-40 דקות.

תוצאה חיובית במהלך תגובות reagin אינה קריטריון לביצוע אבחנה. יש צורך במחקרים ספציפיים למינים נוספים.

שיטת ההקרנה הנפוצה ביותר היא תגובת וסרמן. הוא משתמש בקרדיוליפין ואנטיגנים טרפונמלים. אם אין reagins בסרום הדם, תתרחש המוליזה של אריתרוציטים של ראם, אשר מתווספים כאינדיקטור.

בנוכחות reagins, אריתרוציטים שלמים יפשרו, ובמקרה זה התגובה נחשבת חיובית.

Reaginic במקרים הבאים:

• מחלות אחרות, שגורמיהן דומים במבנה האנטיגני ל-pallidum spirochete
• הֵרָיוֹן
• מחלות אונקולוגיות
• נטילת סליצילטים
• אוטם שריר הלב
• טעויות טכניות בניתוח

עם תוצאה חיובית של התגובה הרג'ינית, מבוצעות בדיקות סרולוגיות ספציפיות. הם גם נקבעים אם תוצאה שלילית מוטלת בספק.

אנטיגנים טרפונמאליים משמשים במבחנים כגון RIF, RIT, ELISA, TPHA, תגובת ספיחה של hemadsorption בשלב המוצק. תגובות אלו מבוססות על יצירת קומפלקסים של אנטיגן-נוגדנים ונבדלות בשיטת קביעתם. התגובה הנפוצה ביותר היא אימונופלואורסצנטי.

התרופה מטופלת בסרום זוהר, המאפשר לך לקבוע את הקומפלקסים החיסוניים תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

אחת הבדיקות הסרולוגיות הרגישות ביותר לאבחון עגבת היא TPHA. השיטה בעלת דיוק גבוה. הוא משמש לעתים קרובות כדי לאמת את האבחנה במהלך ההריון כאשר בדיקות אחרות עשויות לתת תוצאה חיובית שגויה.

תכונות של serodiagnosis

ל אבחון סרולוגי של עגבת בתקופותיה השונותלשאוב דם מוריד. מומלץ לבצע את הניתוח על בטן ריקה, זה מפחית את מספר התוצאות החיוביות השגויות. הצינור חייב להיות סטרילי. בעת ביצוע בדיקות מהירות, במקרים מסוימים, דם נלקח מאצבע.

אם קיים חשד, נוטלים נוזל מוחי לשדרת סרודיאגנוזיס. לניתוח שלה, נעשה שימוש באותן שיטות כמו בחקר הדם.

לאבחון עגבת יש לעבור בדיקה מלאה במרפאתנו.