تشخیص سرولوژیک عفونت سیفلیس روش ها و الگوریتم های آزمایشگاهی مدرن برای تشخیص سیفلیس. نحوه تفسیر تست سیفلیس

تاکسونومی بورلیا، لپتوسپیرا و ترپونما و نام بیماری های ناشی از آنها.

خانواده: Spirochaetaceae

جنس: Borrelia

گونه: B. recurrentis - عامل ایجاد کننده تب عود کننده همه گیر.

جنس: ترپونما

گونه: T. pallidum - عامل ایجاد کننده سیفلیس

جنس: لپتوسپیرا

گونه: L. Icterohaemorrhagiae - عامل ایجاد کننده لپتوسپیروز

تشخیص میکروسکوپی سیفلیس

میکروسکوپ میدان تاریک: قبل از مطالعه، مایع بافتی از انتهای زخم یا نقطه‌ای از غدد لنفاوی گرفته می‌شود. آماده سازی یک قطره خرد شده تهیه می شود: یک قطره از ماده آزمایش به وسط لام شیشه ای اعمال می شود، قطره با یک لغزش پوششی پوشانده می شود تا حباب های هوا وجود نداشته باشد. نتیجه مثبت: ترپونما با 8 تا 12 حلقه بزرگ یکنواخت در میکروسکوپ یافت می شود. آنها با حرکات چرخشی-ترجمه ای صاف، آونگ مانند و خمشی مشخص می شوند.وقتی طبق رومانوفسکی-گیمسا رنگ آمیزی می شوند: عامل ایجاد کننده سیفلیس صورتی کم رنگ می شود، سایر ترپونماها به رنگ قرمز مایل به بنفش در می آیند.

واکنش های مورد استفاده در تشخیص سرمی سیفلیس. مشخصات کلی هر یک از آنها.

RSK(واکنش واسرمن): اجزاء: 1 سیستم - سرم بیمار، تشخیص، مکمل، CNI. سیستم 2 - سرم همولیتیک و سوسپانسیون گلبول های قرمز گوسفند. 1 سیستم آماده می شود، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت انکوبه می شود، سیستم دوم اضافه می شود، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت انکوبه می شود. نتیجه مثبت عدم وجود همولیز است.

RPGA: اجزاء: CNI، سرم بیمار، تشخیص گلبول های قرمز. رقت های سرمی تهیه می شود، تشخیصی اضافه می شود، در ترموستات به مدت 24 ساعت 37 درجه سانتیگراد. کف. نتیجه: چتر

الایزا: اجزاء: سرم بیمار، تشخیصی، مزدوج، بستر کروموژنیک. Diagnosticum با پلاستیک چاه قرص متصل می شود، سرم رقیق شده، مزدوج و بستر اضافه می شود. کف. نتیجه: تغییر در رنگ بستر.

RIF غیر مستقیم: AG روی یک لام شیشه ای اعمال می شود - ترپونما کم رنگ (سویه نیکولز). اسمیرها در هوا خشک می شوند و به مدت 5 دقیقه در استون ثابت می شوند. سرم بیمار با سوسپانسیون ترپونمای غیر بیماری زا از سویه Reiter تخلیه می شود یا 1:200 رقیق می شود، سپس روی آماده سازی استفاده می شود. در یک محفظه مرطوب در دمای 35 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه (1 فاز) نگهداری شود. اسمیرها به مدت 10 دقیقه در ICN شسته شده و خشک می شوند. در مرحله بعد، یک قطره سرم فلورسنت علیه گلوبولین انسانی روی آماده سازی اعمال می شود و در یک محفظه مرطوب در دمای اتاق به مدت 30 دقیقه (فاز 2) انکوبه می شود. اسمیرها با ICN شسته و خشک می شوند. زیر میکروسکوپ فلورسنت مشاهده می شود. واکنش مثبت: درخشش سبز.

واکنش لخته سازی روی شیشه: پلاسمای خون یا سرم گرم نشده با یک آنتی ژن لیپیدی غیر اختصاصی برای چند دقیقه روی یک لام شیشه ای مخلوط می شود. نتیجه مثبت: ذرات آنتی ژن بزرگ شده (لخته) با بزرگنمایی کم قابل مشاهده هستند.

تشخیص سرمی سیفلیس با استفاده از RPHA.

اجزاء: CNI، سرم بیمار، تشخیص گلبول های قرمز. رقت های سرمی تهیه می شود، تشخیصی اضافه می شود، در ترموستات به مدت 24 ساعت 37 درجه سانتیگراد. کف. نتیجه: چتر

تشخیص سرمی سیفلیس با استفاده از الایزا

اجزای تشکیل دهنده: سرم بیمار، تشخیصی، مزدوج، بستر کروموژنیک. Diagnosticum با پلاستیک چاه قرص متصل می شود، سرم رقیق شده، مزدوج و بستر اضافه می شود. کف. نتیجه: تغییر در رنگ بستر.

تشخیص سرمی سیفلیس با استفاده از RSK.

واکنش واسرمن: می توانید از سرم خون و مایع مغزی نخاعی بیمار (در مرحله نوروسیفلیس) استفاده کنید. به عنوان یک تشخیص - آنتی ژن ترپونمال یا کاردیولیپین. اجزاء: 1 سیستم - سرم بیمار، تشخیص، مکمل، CNI. سیستم 2 - سرم همولیتیک و سوسپانسیون گلبول های قرمز گوسفند. 1 سیستم آماده می شود، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت انکوبه می شود، سیستم دوم اضافه می شود، در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت انکوبه می شود. نتیجه مثبت عدم وجود همولیز است.

روش های تشخیص میکروبیولوژیک لپتوسپیروز.

روش باکتریوسکوپی: آماده سازی یک قطره خرد شده، آن را در یک میکروسکوپ میدان تاریک مطالعه کنید: رشته های نازک متحرک با خم شدن در انتها (فرهای ثانویه) - به شکل براکت یا حرف S.

روش باکتریولوژیک: مواد - خون، ادرار، مایع مغزی نخاعی. این ماده (3-5 لوله آزمایش) در محیط آب-سرم، محیط فلچر، سیب زمینی تلقیح می شود. تا 30 روز در دمای 30-28 درجه سانتیگراد در اتمسفر CO 2 انکوبه می شود. برای تشخیص رشد لپتوسپیرا، 10 روز پس از تلقیح، مواد از لوله آزمایش گرفته می شود، آماده سازی پتاسیم خرد شده تهیه می شود و در زیر میکروسکوپ میدان تاریک مطالعه می شود. از لوله آزمایشی که در آن رشد لپتوسپیرا پیدا شد، آنها را به 3 لوله آزمایش با محیط غذایی تازه کشت می کنند و به مدت 7-10 روز انکوبه می شوند، دما یکسان است. برای تمایز، آزمایش بی کربنات انجام می شود، فعالیت همولیتیک، فعالیت فسفولیپاز تعیین می شود. با ساختار آنتی ژنی با استفاده از سرم های آگلوتینه کننده شناسایی شد.

تحقیقات بیولوژیکی: خوکچه هندی با 1 گرم از ماده آزمایش به صورت داخل صفاقی تزریق می شود و به مدت یک ماه با توجه به درجه حرارت و وزن بدن، ظاهر زردی و خونریزی و همچنین مرگ حیوان مشاهده می شود.

مطالعه سرولوژیکی: AT در سرم از 2 هفته ظاهر می شود. از واکنش میکروآگلوتیناسیون و لیز لپتوسپیرا استفاده کنید. سرم بیمار دو بار از 1:100 تا 1:1600 رقیق می شود. 0.2 میلی لیتر سرم رقیق شده و به همان میزان از کشت زنده سویه های لپتوسپیرا به تعدادی از لوله های آزمایش اضافه می شود. به مدت 1 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید. یک قطره خرد شده از محتویات هر لوله آزمایش تهیه می شود و میکروسکوپ می شود. آنتی بادی های موجود در سرم اولین رقت ها باعث لیز - انحلال یا تورم دانه ای لپتوسپیرا می شوند. در رقت های بعدی - آگلوتیناسیون - به شکل عنکبوت آگلومره می شود. ارزش تشخیصی در رقت 1:400 و بالاتر واکنش مثبت دارد.

1. پوتکایف N.N.، Frigo N.V.، Almazova A.A.، Lebedeva G.A. اپیدمیولوژی سیفلیس در شرایط مدرن. بالینی پوست و ونیرولوژی. 2015;1:22-34.
2. Larsen SA، Steiner BM، Rudolph AH. تشخیص آزمایشگاهی و تفسیر آزمایشات سیفلیس. Clin Microbiol Rev 1-21 ژانویه 1995.
3. کولز AC. Spirochaeta pallida.روش های بررسی و تشخیص، به ویژه با استفاده از روشنایی زمین تاریک. بردار مد 1909;1:1117-1120.
4. Kellogg، DSJr، Mothershed SM. تشخیص ایمونوفلورسانس از ترپونما پالیدوم: بازنگری. جاما 1969;107:938-941.
5. Mullis KB. سنتز اختصاصی DNA در شرایط آزمایشگاهی از طریق یک واکنش زنجیره ای کاتالیز شده با پلیمراز. مت آنزیمول. 1987;155:335.
6. Centurion-Lara A. تشخیص ترپونما پالیدوم توسط PCR حساس ترانس کریپتاز معکوس. جی کلین میکروبیول. 1997;35;6:1348-1352.
7. Wassermann A، Neisser A، Brück C. Eine serodiagnostische Reaktion bei Siphilis. Dtsch Med Wochenschr. 1906;32:745-746.
8. Pangborn MC. کاردیولیپین و کاربرد آن در یک آنتی ژن تصفیه شده شیمیایی برای تشخیص سرمی سیفلیس آزمایشگاه بهداشت عمومی دولتی Proc N Y. 1946;26(1):26-29.
9. Pangborn MC. مطالعه ترکیب کاردیولیپین. FedProc. 1946؛ 5 (1 Pt 2): 149.
10. Dmitriev G.A., Bragina E.E. روش های مدرن تشخیص آزمایشگاهی سیفلیس. قسمت اول بولتن پوست. 1996;2:29-33.
11. Dmitriev G.A., Bragina E.E. روش های مدرن تشخیص آزمایشگاهی سیفلیس. قسمت دوم. بولتن پوست. 1996;3:33-38.
12. نتایج مثبت غیراختصاصی آزمایشات سرولوژیکی برای سیفلیس. تغییرات کمی تست های سرولوژیکی مدرن. رهنمودها M. 1990.
13. دستور وزارت بهداشت شماره 87 فدراسیون روسیه در 26 مارس 2001 "در مورد بهبود تشخیص سرولوژیکی سیفلیس".
14. انجمن متخصصین پوست روسیه. دستورالعمل های بالینی فدرال برای مدیریت بیماران مبتلا به سیفلیس. M. 2013.
15. Lyakhov V.F.، Borisenko K.K.، Potekaev N.S.، و همکاران دینامیک ایمونوگلوبولینمی اختصاصی ترپونما در اشکال اولیه سیفلیس. بولتن پوست. 1990;8:38-42.
16. Kiseleva G.A.، Tkachev V.K.، Bednova V.N.، و همکاران. مطالعه تطبیقی ​​حساسیت و ویژگی سه ایمونواسی آنزیمی طراحی شده برای شناسایی ایمونوگلوبولین های کلاس M به عامل ایجاد کننده سیفلیس. بولتن پوست. 2000;4:6-10.
17. ارماتووا F.A. تعیین ایمونوگلوبولین های کلاس M ویژه برای تشخیص زودرس سیفلیس (مطالعه بالینی و آزمایشگاهی):دیس … صمیمانه. عسل. علوم. M. 2014.
18. Mardanly S.G.، Arsenyeva V.A.، Aniskova I.N.، Zhigalenko A.R. سیستم تست داخلی "Line-Blot Syphilis-IgM" برای تشخیص آنتی بادی های IgM به ترپونما پالیدوم توسط ایمونوبلات خطی درماتولوژی بالینی و ونورولوژی. 2013;5:35-38.
19. گوسوا اس.ن. استفاده از تست IgM-RIFabs در معاینه زنان باردار از نظر فعالیت عفونت سیفلیس. مجله روسی پوست و بیماری های مقاربتی. 2004;6:60-63.
20. Ovchinnikov N.M.، Bednova V.N.، Delektorsky V.V. تشخیص آزمایشگاهی بیماری های مقاربتی. M. 1987.
21. لی کی، پارک اچ، روه ای، شین اس، پارک کی یو، پارک ام اچ، سونگ ای. خصوصیات سرم با نتایج ناسازگار از غربالگری توالی معکوس برای سیفلیس. Biomed Res Int. 2013;2013:269-347.
22. بینیکر ام جی. از کدام الگوریتم باید برای غربالگری سیفلیس استفاده کرد؟ Curr Opin Infect Dis. 2012 فوریه؛ 25 (1): 79-85.
23. Castro A, Jost H, Cox D, Fakile Y, Kikkert S, Tun Y, Zaidi A, Park M. مقایسه سطح تحلیلی توافق نه سنجش ترپونمال برای سیفلیس و پیامدهای احتمالی برای الگوریتم غربالگری. BMJ Open. 3 (9) 19 سپتامبر 2013.
24. پارک آی یو، چاو جی ام، بولان جی، استنلی ام، شیه جی، شاپیرو جی ام. غربالگری سیفلیس با روش ایمونواسی ترپونمال: تجزیه و تحلیل نتایج سرولوژی ناسازگار و پیامدها برای مدیریت بالینی. J Infect Dis. 2011 نوامبر؛ 204 (9): 1297-1304.

دانشگاه ملی تحقیقات پزشکی روسیه N.I. Pirogova

گروه درماتوونرولوژی، دانشکده اطفال

گزارش با موضوع: روش های آزمایشگاهی برای تشخیص سیفلیس

تکمیل شده توسط: دانش آموز 440 در گروه

دانشکده اطفال

سرانوف ایگور آناتولیویچ

مطالعات غیر ترپونمال

مطالعات ترپونمال

مجتمع برای انجام واکنش های سرولوژیکی

واکنش واسرمن

واکنش ایمونوفلورسانس

واکنش چسبندگی ایمنی

واکنش بی حرکتی ترپونما پالیدوم

واکنش ایمونوفلورسانس جذب ترپونما پالیدوم

واکنش هماگلوتیناسیون

سنجش ایمونوسوربنت مرتبط

واکنش زنجیره ای پلیمراز

تمام روش های تحقیق سرولوژیکی که امروزه مورد استفاده قرار می گیرند به طور مشروط به دو نوع تقسیم می شوند: غیر ترپونمال، واجد شرایط (NTT) - و ترپونمالکه وجود عامل بیماری زا (TT) را تأیید می کند. سیفلیس بسیار دشوار است، کلینیک بسیار تار است و همیشه خود را نشان نمی دهد، بنابراین برای تشخیص صحیح از چندین آزمایش سرولوژیکی به طور همزمان استفاده می شود. با تأیید بصری وجود ترپونما رنگ پریده در مواد گرفته شده (با استفاده از میکروسکوپ)، تشخیص بلافاصله انجام می شود و آزمایشات دیگر به ندرت انجام می شود.

مطالعات غیر ترپونمال(تست ها) - NTT به اصطلاح مطالعات غربالگری هستند، آنها خیلی گران نیستند و با کمک آنها می توانید تعداد نسبتاً زیادی از بیماران را بررسی کنید، علاوه بر این، نتایج بسیاری از آزمایشات خیلی سریع آماده می شود. اما با یک دوره نادرست بیماری، با حساسیت کم، چنین آزمایشاتی غیرعملی است و نمی توان نتیجه 100٪ را به دست آورد.

هنگام انجام غیر ترپونمالآزمایشات در ماده مورد بررسی، آنتی بادی هایی شناسایی می شوند که با آنها واکنش نشان می دهند کاردیولیپین - آنتی ژن لسیتین. یکی از اولین آزمایش ها روشی مبتنی بر واکنش ایمونولوژیک Bordet-Jangu بود که در آن عصاره کبد یک کودک تازه متولد شده که بر اثر سیفلیس فوت کرده بود به عنوان یک آنتی ژن عمل می کرد. امروزه هنگام انجام چنین آزمایشاتی، آنتی ژن است لسیتین، کلسترول و کاردیولیپین.

در خارج از کشور، به ویژه در ایالات متحده آمریکا، از 4 روش غیر ترپونمال استفاده می شود که به دو نوع تقسیم می شوند: روش هایی که به شما امکان می دهد به صورت بصری نتایج واکنش را تعیین کنید (RPR و TRUST) و روش هایی برای خواندن میکروسکوپی نتایج (USR) و VDRL).

روش های تشخیصی غیر ترپونمال شامل غیر مستقیم است سنجش ایمونوسوربنت مرتبطاستفاده از کاردیولیپین به عنوان آنتی ژن در کشور ما و در کشورهای CIS واکنش پلاسما با سرم غیر فعال (MR)و واکنشی که در آن تعارف با آن همراه است کاردیولیپین (RCC).

تمام روش های تشخیصی غیر ترپونمال بسیار شبیه به یکدیگر هستند. همه آنها هزینه کمی دارند، ساده و سریع انجام می شوند. این نوع آزمایش ها برای تشخیص بیماری در مرحله اولیه و برای سیفلیس که مخفیانه رخ می دهد (شکل نهفته سیفلیس) مناسب نیستند. آنتی بادی هایی که با آزمایش غیر ترپونما مشخص می شوند حدود یک ماه پس از عفونت با ترپونما ظاهر می شوند. در اغلب موارد، در بیمارانی که برای مرحله اولیه سیفلیس تحت درمان قرار گرفته اند، آزمایشات غیر ترپونمال برای حدود یک سال منفی است.

مطالعات ترپونمال(تست) - TT ها بسیار گران تر هستند، تکنیک بسیار پیچیده است و از آنها برای تایید نتایج مثبتی که در مطالعات غیر ترپونمال به دست آمده است استفاده می شود.

همانطور که در بالا گفتیم روش های ترپونمالبرای تایید وجود ترپونما رنگ پریده در بدن استفاده می شود که با استفاده از تست های غیر ترپونما تشخیص داده شد. آنها همچنین در صورتی انجام می شوند که آزمایشات انجام شده نتیجه مثبتی نداشته باشد، اما کلینیک وجود بیماری را پیشنهاد می کند. پس از درمان کامل سیفلیس، بیش از 80٪ از افرادی که درمان شده اند، هنگام انجام آزمایش ترپونمال برای چندین سال دیگر، و برای برخی - مادام العمر، واکنش مثبت نشان می دهند. بر این اساس تست های ترپونمال برای معاینات پیشگیرانه در افرادی که دوره کامل درمان را گذرانده اند استفاده نمی شود.

تحقیقات علمی در زمینه ایمونولوژی و زیست شناسی مولکولی به طور مداوم ادامه دارد و با کمک آخرین فن آوری ها، آزمایش های جدید بیشتری برای تشخیص سیفلیس در حال ظهور است که به طور محکم پیشرو هستند. یکی از این آزمون ها که در عمل به طور محکم ثابت شده است - ایمونواسی آنزیمی (ELISA)، و بسیاری از روش های تحقیق در حال توسعه هستند.

که مجتمع تست سرولوژیکی، که در روسیه انجام می شود، شامل یک رفتار جامع از واکنش های سرولوژیکی است:

واکنش های سرولوژیکی استاندارد -

واکنش تثبیت مکمل (واکنش واسرمن)،

واکنش با آنتی ژن ترپونمال و واکنش با کاردیولیپین؛

واکنش‌های ترپونمال گروهی -

واکنش ایمونوفلورسانس (RIF)

واکنش چسبندگی ایمنی (RIP)؛

واکنش های ترپونمال پروتئین خاص گونه -

واکنش بی حرکتی ترپونم (RIT)

RIF - abs و انواع آن (IgM-FTA-ABS، 19S-IgM-FTA-ABS)،

واکنش همگلوکسیناسیون غیرفعال ترپونم ها (TPHA).

در صورت استفاده از آزمایشات سرولوژیکی به صورت ترکیبی، تشخیص بیماری در مراحل اولیه بیماری امکان پذیر خواهد بود.

واکنش واسرمن روشی برای تثبیت مکمل است. برای انجام واکنش، از عصاره ها به عنوان آنتی ژن استفاده می شود که از ترپونماهای رنگ پریده (آنتی ژن های خاص) ساخته می شود و کاردیولیپین عصاره ای است که از عضله قلب گاو نر (آنتی ژن های غیر اختصاصی) تهیه می شود. هر چه ترپونماهای رنگ پریده در مواد آزمایش مشاهده شود، درجه بیماری بیشتر است و درجه را با علامت های مثبت ارزیابی می کند:

1) - منفی؛ 2) + مشکوک; 3) ++ ضعیف مثبت؛ 4) +++ مثبت؛ 5) ++++ به شدت مثبت.

واکنش واسرمن (واکنش تثبیت مکمل)بدون شکست، آنها همراه با واکنش های رسوبی - ساکس - ویتبسکی و کان انجام می شوند. ماهیت ایمونولوژیک واکنش‌ها به طور کلی مانند واکنش واسرمن است، اما این واکنش‌ها به آنتی‌ژن‌های اشباع‌شده بیشتری نیاز دارند، که وقتی با ری‌آگین‌های سرمی واکنش نشان می‌دهند، رسوب بیشتری ایجاد می‌کنند. در صورت منفی بودن تست های سرولوژیکی استاندارد، سیفلیس اولیه سرم منفی تشخیص داده می شود. تشخیص سیفلیس واکنش واسرمن در سیفلیس ثانویه مثبت سرمی موثر است، در اینجا نتایج آزمایش 100٪ صحیح است.. در مرحله سوم سیفلیس فعال، نتایج در بیش از نیمی از بیماران صحیح است و در آخرین مراحل سیفلیس با آسیب به اندام ها و سیستم های داخلی، نتایج در نیمی از بیماران درست است. در بیماران مبتلا به سیفلیس مادرزادی اولیه، آزمایشات سرولوژیکی تقریباً همیشه نتیجه مثبت می دهدو در بیماران مبتلا به سیفلیس مادرزادی دیررس - تقریباً در 80٪ موارد.

اصل RSK این است که ریاژین های موجود در سرم خون بیماران مبتلا به سیفلیس توانایی ورود به ترکیبات با آنتی ژن های مختلف را دارند. کمپلکس های حاصل، مکمل وارد شده به واکنش را مرتب می کنند. یک سیستم همولیتیک (مخلوطی از گلبول های قرمز قوچ با سرم همولیتیک) برای نشان دادن کمپلکس ریگین-آنتی ژن-مکمل استفاده می شود. در حضور کمپلکس، گلبول های قرمز رسوب می کنند. که با چشم غیرمسلح قابل توجه است. شدت همولیز توسط پزشک با کلیدها نشان داده می شود: به شدت مثبت 4+، مثبت 3+، ضعیف مثبت 2+ یا 1+ و منفی. علاوه بر ارزیابی کیفی این واکنش ها، یک ارزیابی کمی نیز وجود دارد که در تشخیص مراحل خاصی از سیفلیس و نظارت بر اثربخشی درمان مهم است.

واکنش ایمونوفلورسانس (RIF)این بر اساس تشخیص آنتی بادی هایی است که با یک محلول فلورسنت مخصوص برچسب گذاری شده اند تا آنتی بادی های مرتبط با آنتی ژن در پرتوهای بنفش یک لامپ کوارتز را شناسایی کنند. این واکنش بسیار حساس است و به شناسایی بیماری در مرحله اولیه سیفلیس سرم منفی کمک می کند. همچنین این آزمایش است که به شناسایی بیماری در بیمارانی که بیماری در آنها نهفته یا در مراحل پایانی است کمک می کند. انواع مختلفی از این واکنش ها وجود دارد و RIF-200 با ارزش ترین آنهاست که با آن می توانید سیفلیس نهفته را تشخیص دهید و نتایج غیر اختصاصی CSR را تشخیص دهید. اما، با وجود نرخ بالای RIF-200، تشخیص پس از انجام تمام آزمایشات بالینی انجام می شود. RIF برای نظارت بر بیماران پس از درمان کامل مناسب نیست، زیرا در مرحله درمان به آرامی منفی است.

واکنش چسبندگی ایمنی (RIP). این واکنش بر اساس چسبندگی ترپونماهایی است که توسط سرم حساس می شوند به گلبول های قرمز و رسوب آنها. نتایج بر اساس جدول زیر ارزیابی می شود:

منفی - 0-20٪

مشکوک-21-30%;

ضعیف مثبت - 31-50٪؛

مثبت-51-100%.

RIP از همه نظر بسیار شبیه RIF و RIT است. این واکنش در موارد متعددی انجام می شود، در صورتی که سفلیس بر اساس تظاهرات بالینی، تاریخچه، آزمایشات آزمایشگاهی تأیید نشود، برای کنترل بیماری پس از دریافت درمان لازم و تأیید نتایج CSR.

واکنش بی حرکتی ترپونما پالیدوم (RIT)هنگامی که در محیطی قرار می گیرد که در آن بی حرکتی سرم آزمایش و مکمل فعال وجود دارد، ترپونماهای رنگ پریده تحرک خود را از دست می دهند. این اساس این واکنش است. RIT بسیار اختصاصی است و برای تشخیص سیفلیس نهفته، برای تشخیص زنان بارداری که در آنها مشکوک به سیفلیس است و بسیاری موارد دیگر که در آن تست‌های سرولوژیکی استاندارد از ویژگی کمی برخوردار هستند استفاده می‌شود. عیب بزرگ این واکنش این است که بسیار گران است و انجام آن یک فرآیند بسیار پیچیده است. نتایج با توجه به داده های درصد بی حرکتی ترپونماهای رنگ پریده خوانده می شود:

منفی - تا 20٪؛ مشکوک -21-30%؛ مثبت ضعیف -31-50٪؛ -مثبت -51-100%.

با توجه به اینکه ایموبیلیسین ها دیرتر از سایر آنتی بادی ها در خون ظاهر می شوند، واکنش کمی دیرتر از سایر واکنش ها مثبت می شود. در مرحله اولیه عفونت، به عنوان یک قاعده، یک واکنش منفی یا ضعیف مثبت مشاهده می شود. در مرحله ثانویه سیفلیس، اگرچه ظاهر ایموبیلیزین ها در سرم خون بیمار تا 60% مشاهده می شود، واکنش تقریباً در نیمی از افراد مثبت است. با عود مرحله ثانویه سیفلیس، RIT تقریباً در 90٪ بیماران مثبت است. در مرحله سوم توسعه سیفلیس، با آسیب به اندام های داخلی، از جمله سیستم عصبی، زمانی که واکنش Wasserman نتایج منفی می دهد، واکنش بی حرکتی ترپونما رنگ پریده تقریبا در 100٪ بیماران مثبت است. در مراحل اولیه سیفلیس مادرزادی، واکنش تقریباً در همه بیماران نتیجه مثبت دارد و در اواخر مرحله سیفلیس مادرزادی - تقریباً در 100٪ بیماران.سیفلیس نهفته سرم مثبت تنها پس از RIT تایید می شود که پس از به دست آوردن نتایج مثبت در طی سایر آزمایشات سرولوژیکی انجام می شود. RIT برای کنترل بیماری در بیماران استفاده نمی شودکه درمان لازم را دریافت کردند.

تست ایمونوفلورسانس جذب ترپونما پالیدوم (FTA-ABS).اگر واکنش برای بیمار مبتلا به سیفلیس و درمان نشده انجام شود، این واکنش همیشه یک نتیجه مثبت می دهد. همچنین احتمال بالایی برای تشخیص عفونت با استفاده از FTA-ABS در همان ابتدای بیماری وجود دارد.. واکنش حساسیت و ویژگی بالایی دارد. برای تشخیص سیفلیس نهفته و در مواردی که قبلاً چندین آزمایش انجام شده و نتیجه منفی نشان داده است، اما کلینیک از عفونت با ترپونما کم رنگ صحبت می کند، در چنین مواردی تشخیص اغلب بر اساس نتایج FTA-ABS انجام می شود. . به معنای واقعی کلمه یک هفته پس از ورود ترپونما کم رنگ به بدن، آنتی بادی های اختصاصی IgM شروع به تولید می کنند که در نهایت ظاهر نمی شوند و پس از 2 سال دیگر شناسایی نمی شوند. برای درک اینکه آیا درمان پیشنهادی موثر است، آزمایش‌های خاصی انجام می‌شود که ویژگی این آنتی‌بادی‌ها را تعیین می‌کند. امروزه چندین آزمایش از این دست وجود دارد، اما انجام آنها بسیار گران است، بنابراین این آزمایشات برای اکثر بیماران انجام نمی شود.

واکنش هماگلوتیناسیونکه آنتی بادی های اختصاصی برای ترپونما کم رنگ (micro-TPHA) را تعیین می کند. برای این واکنش، ترپونماها به عنوان یک آنتی ژن عمل می کنند، بنابراین این واکنش بسیار خاص است و در بیشتر موارد نتایج واقعی می دهد.

آنزیم ایمونواسی (ELISA)یکی از خاص ترین برای تشخیص سیفلیس. امروزه بیشتر از انواع غیر مستقیم الایزا استفاده می شود. مزایای این روش تحقیق واضح است: هزینه زیاد، سهولت اجرا، دقت بالای نتیجه، با کمک این تجزیه و تحلیل می توان سفلیس را در مراحل اولیه تشخیص داد، نتایج سریع را نشان داد.

در هسته روش ایمونوبلاتنهفته است آنزیم ایمونواسی، که با الکتروفورز ترکیب شده است. یکی از اختصاصی ترین آزمایش هاست و با کمک آن عفونت سیفلیس تایید می شود.

واکنش زنجیره ای پلیمراز (روش تحقیق اختصاصی)برای ایجاد تشخیص در دوره نهفته عفونت سیفلیس انجام شد. هنگام انجام PCR، پاتوژن حتی در مرحله اولیه بیماری در مواد آزمایش یافت می شود. ماده ژنتیکی شناسایی شده توسط DNA تقسیم می شود و بنابراین تشخیص پاتوژن بسیار آسان می شود. در نوروسیفلیس، هنگامی که تشخیص عفونت هنگام انجام سایر آزمایشات به دلیل حساسیت بسیار کم بسیار دشوار است، در سیفلیس مادرزادی، در مرحله اولیه سیفلیس سرم منفی و برای تشخیص در افراد آلوده به HIV، PCR ضروری است. مطالعه مایع مغزی نخاعیبا سیفلیس، در صورت وجود ضایعات بالینی سیستم عصبی در مراحل اولیه بیماری، با فرم نهفته و همیشه قبل از شروع درمان انجام می شود. همچنین، این تجزیه و تحلیل برای بیماران مبتلا به نوروسیفلیس در مراحل پایانی سیفلیس و با فرم نهفته تجویز می شود. آزمایشگاه بالینی مطالعه سیتوز، محتوای پروتئین، واکنش های Pandey و Nonne-Apelt را انجام می دهد. در آزمایشگاه های سرولوژیکی واکنش Wasserman، Lange، RIF، RIFyu، RIFts، RIT انجام می شود.

این سایت اطلاعات مرجع را فقط برای مقاصد اطلاعاتی ارائه می دهد. تشخیص و درمان بیماری ها باید زیر نظر متخصص انجام شود. همه داروها منع مصرف دارند. مشاوره تخصصی لازم است!

تماس با یک متخصص ورونیک - چرا لازم است؟

شرح حال- جمع آوری اطلاعات لازم برای شناسایی تشخیص: شکایات بیمار، اطلاعات در مورد برخی از جنبه های زندگی جنسی و تماس با افراد مشکوک بیماری های مقاربتیافراد بیماری های مقاربتی گذشته، اطلاعاتی در مورد نتایج درمان آنها. تمام این اطلاعات به پزشک معالج اجازه می دهد تا بر روی محتمل ترین بیماری هایی که باعث شده بیمار به دنبال کمک تخصصی باشد، تمرکز کند.

به دنبال معاینه بالینی. غشاهای مخاطی و پوست اندام های تناسلی، ناحیه مقعد و مخاط دهان تحت دقیق ترین معاینه قرار می گیرند. توجه بیشتر به لمس گروه های بیرونی غدد لنفاوی، لمس کانون های نکروز عفونی شناسایی شده است. اغلب در این مرحله، تشخیص سیفلیس را می توان با احتمال نسبتاً بالایی انجام داد.

با این حال، به منظور تشخیص نهایی، و همچنین برای نظارت بر پویایی روند در طول درمان، لازم است تست های آزمایشگاهی.

تایید آزمایشگاهی سیفلیس - شامل چه مواردی است و چگونه انجام می شود؟

2. واکنش فلورسانس مستقیماین روش تشخیصی با پردازش بیومتریال با سرم فلورسنت ویژه انجام می شود که منجر به اتصال مجتمع های ایمنی خاص بر روی سطح ترپونما کم رنگ می شود. در نتیجه این واکنش، هنگامی که میکروسکوپ مواد زیستی پردازش شده در یک میکروسکوپ فلورسنت، ترپونما کم رنگ درخشان و ظریف به نظر می رسد.

3. PCR ( واکنش زنجیره ای پلیمراز). این روش به شما امکان می دهد DNA یک عامل عفونی را شناسایی کنید و حضور آن را در بدن بیمار مشخص کنید.

علائم ایمونولوژیک سیفلیس چگونه تشخیص داده می شود و چرا باید آنها را شناسایی کرد؟
کل گروه مطالعات پارامترهای ایمنی به منظور تشخیص بیماری های عفونی نامیده می شود سرولوژی. امروزه روش های تشخیصی سرولوژیکی زیادی وجود دارد، اما همه آنها با این واقعیت متحد شده اند که بیومتریال در تشخیص، خون بیمار است. با توجه به تشخیص سیفلیس، تمام آزمایشات سرولوژیکی را می توان به ترپونمال تقسیم کرد - تشخیص آنتی بادی در برابر عناصر ساختاری ترپونما کم رنگ و غیر ترپونما - آشکار کننده تغییرات ایمنی مرتبط با عواقب فعالیت باکتری.

سرولوژی غیر ترپونمال
1. ریزواکنش بارشی (VDRL).این مطالعه در خون بیمار آنتی بادی های تولید شده توسط سیستم ایمنی بدن در برابر سلول های آسیب دیده توسط ترپونما کم رنگ را شناسایی می کند. این تست دارای قابلیت اطمینان بالا، اما ویژگی کم است. واقعیت این است که آنتی بادی های قابل تشخیص می توانند در بسیاری از بیماری ها و شرایط پاتولوژیک در خون وجود داشته باشند. بنابراین، این آزمایش تنها به عنوان یک غربالگری برای یک بیماری مورد استفاده قرار می گیرد و مشکوک به یک بیماری را آشکار می کند. با این حال، این روش دارای مزیت بسیار ارزشمندی در تشخیص اثربخشی درمان است. اگر بیمار درمان شود، ریزواکنش رسوبی با آنتی ژن کاردیولیپین بر خلاف سایر انواع تحقیقات سرولوژیکی که می تواند برای مدت طولانی نتیجه مثبت بدهد، منفی می شود.

2. واکنش واسرمناین مطالعه با واکنش تثبیت کمپلمان - یکی از مکانیسم‌های اجرای پاسخ ایمنی مرتبط است.
آزمون به صورت مثبت ارزیابی می شود ( نه در صلیب، همانطور که بسیاری معتقدند!). و واکنش منفی است در نتیجه نظرسنجی منهای نشان داد)، مشکوک ( در نتیجه نظرسنجی، 1 به علاوه + نشان داده شده است، ضعیف مثبت ( در نتیجه معاینه، 2 مثبت ++ نشان داده شده استواکنش مثبت ( در نتیجه معاینه، 3 علامت مثبت +++ نشان داده شده است، یک واکنش شدید مثبت ( در نتیجه معاینه، 4 علامت مثبت ++++ نشان داده شده است).

سرولوژی ترپونمال
1. واکنش ایمونوفلورسانس (RIF).این نوع مطالعه، آنتی بادی های تولید شده توسط سیستم ایمنی فرد مبتلا را شناسایی می کند. برای این کار، تعامل سرم خون بیمار و یک آماده سازی خاص حاوی آنتی بادی انجام می شود. پس از اختلاط پلاسمای خون بیمار و معرف با آنتی بادی های خاص که با یک ماده فلورسنت خاص برچسب گذاری شده اند، آنها متصل می شوند. این مطالعه با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت ویژه انجام می شود.

2. ایمونواسی آنزیمی (ELISA).این تحلیل مستحق جزئیات بیشتر است. از آنجایی که در شناسایی اکثر بیماری های عفونی اصلی ترین است. این روش بر اساس یک واکنش آنتی ژن-آنتی بادی بسیار اختصاصی انتخابی است. یکی از ویژگی های این تجزیه و تحلیل این است که می توان از آن برای تشخیص آنتی بادی های کلاس های مختلف استفاده کرد. IgA IgM IgG ) . همچنین توانایی این تجزیه و تحلیل برای تعیین مقدار آنتی بادی های شناسایی شده مهم است. در نتیجه، تعیین نوع آنتی بادی ها و مؤلفه کمی آن به ما امکان می دهد در مورد مدت زمان بیماری، پویایی فرآیند، فعالیت پاتوژن و سیستم ایمنی بیمار نتیجه گیری کنیم. در نتیجه، معلوم شد که این تجزیه و تحلیل در تشخیص بیماری های عفونی و همچنین نظارت بر پویایی بیماری در پس زمینه درمان مداوم ضروری است.

3. واکنش هماگلوتیناسیون غیرفعال (RPHA).این واکنش بر اساس آگلوتیناسیون ناشی از ایمونولوژیک گلبول های قرمز است. مکانیسم این واکنش به این صورت است که گلبول های قرمز به طور مقدماتی آماده می شوند که بر روی سطح آن اجزای پروتئینی ترپونما کم رنگ ثابت می شوند. بنابراین، هنگامی که با پلاسمای خون حاوی آنتی بادی های ترپونما مخلوط می شود، گلبول های قرمز به هم می چسبند - خون از قرمز به دانه دانه تبدیل می شود. یک واکنش هماگلوتیناسیون مثبت 4 هفته پس از عفونت می شود. پس از درمان موفقیت آمیز سیفلیس، این واکنش می تواند در طول زندگی مثبت باقی بماند.

با توجه به مطالب گفته شده، مشخص است که موضوع تشخیص، نظارت بر اثربخشی درمان و درمان، کاری نسبتاً پیچیده و زمان بر است. و درک اهداف و نتایج مطالعه برای بیماری که تحصیلات پزشکی ندارد غیرممکن است. با این حال، ما سعی خواهیم کرد پویایی تغییرات ایمونولوژیک در مراحل مختلف سیفلیس و شاخص‌های آزمایشگاهی که این تغییرات را آشکار می‌کنند به شکلی در دسترس ارائه کنیم.

بنابراین - یک نظریه کوچک. پس از عفونت، سلول های ایمنی ابتدا با ترپونما پالیدوم مواجه می شوند. با شناسایی آن به عنوان یک میکروارگانیسم خارجی، سلول های دارای قابلیت ایمنی شروع به تشکیل فعال یک پاسخ ایمنی می کنند. آنتی بادی های اختصاصی ترپونما پالیدوم IgM، در خون بیمار 7 روز پس از عفونت، آنتی بادی یافت می شود IgGبعداً - پس از 4 هفته سنتز می شود. این 2 دسته از آنتی بادی ها از نظر ساختار متفاوت هستند، اما برای تشخیص مهم است IgMدر مراحل اولیه عفونت ( برای عفونت اخیر چه معنایی دارد؟) یا در حضور فعالیت عفونت بالا. تشخیص IgG فقط نشان دهنده تشکیل ایمنی پایدار در برابر این عفونت است، تنها یک سری از تجزیه و تحلیل تیتر آنتی بادی در پویایی به ما امکان می دهد درمان بیماری یا فعالیت عفونت را ارزیابی کنیم. ضد چربی ( غیر اختصاصی) کمپلکس های ایمونولوژیک به طور فعال 4-5 هفته پس از عفونت سنتز می شوند.
نکته مهم این است که در طول دوره تظاهرات بالینی سیفلیس در خون، آنتی بادی های اختصاصی برای ترپونما کم رنگ شناسایی می شوند. IgM، و کلاس IgG (آنتی بادی های کل). یک پارامتر مهم در فرآیند درمان، تغییر در پارامترهای کمی آنتی بادی ها است. درمان مناسب انتخاب شده به کاهش شدید غلظت کمک می کند IgM، در برابر پس زمینه یک سطح پایدار IgG- این شاخص ها نشان دهنده ایمنی پایدار تشکیل شده نسبت به ترپونما کم رنگ در پس زمینه کاهش فعالیت عفونی آن است. توجه به این نکته ضروری است که آنتی بادی های اختصاصی ترپونما می توانند سال ها در خون انسان باقی بمانند و در برخی از انواع مطالعات نتایج مثبتی به دست آورند.

چگونه نتایج مطالعات سرولوژیکی را تفسیر کنیم؟

تست ریجین برای غربالگری انبوه بیماران از نظر سیفلیس استفاده می شود. آنها معمولاً به عنوان بخشی از معاینات پیشگیرانه انجام می شوند. چنین آزمایشاتی در هر مرکز پزشکی موجود است و به سرعت انجام می شود. جواب معمولا بعد از 30-40 دقیقه آماده می شود.

نتیجه مثبت در طی واکنش های ریگین معیاری برای تشخیص نیست. مطالعات مربوط به گونه های خاص مورد نیاز است.

رایج ترین روش غربالگری واکنش واسرمن است. از آنتی ژن های کاردیولیپین و ترپونمال استفاده می کند. اگر در سرم خون Reagin وجود نداشته باشد، همولیز گلبول های قرمز قوچ رخ می دهد که به عنوان یک شاخص اضافه می شود.

در حضور ریگین ها، گلبول های قرمز کامل رسوب می کنند که در این صورت واکنش مثبت تلقی می شود.

Reaginic در موارد زیر:

• سایر بیماری ها که عوامل ایجاد کننده آن از نظر ساختار آنتی ژنی مشابه اسپیروکت پالیدوم است.
• بارداری
• بیماری های انکولوژیک
• مصرف سالیسیلات ها
• انفارکتوس میوکارد
• خطاهای فنی در تحلیل

با یک نتیجه مثبت از واکنش reaginic، آزمایشات سرولوژیکی خاص انجام می شود. آنها همچنین در صورت شک در نتیجه منفی تجویز می شوند.

آنتی ژن های ترپونمال در سنجش هایی مانند RIF، RIT، ELISA، TPHA، واکنش همادجذب در فاز جامد استفاده می شوند. این واکنش ها بر اساس تشکیل کمپلکس های آنتی ژن-آنتی بادی است و در روش تعیین آنها متفاوت است. متداول ترین واکنش مورد استفاده، ایمونوفلورسانس است.

این دارو با سرم درخشان درمان می شود، که به شما امکان می دهد مجتمع های ایمنی را در زیر میکروسکوپ فلورسنت تعیین کنید.

یکی از حساس ترین تست های سرولوژیکی برای تشخیص سیفلیس، TPHA است. این روش از دقت بالایی برخوردار است. اغلب برای تأیید تشخیص در دوران بارداری استفاده می شود، زمانی که آزمایش های دیگر ممکن است نتیجه مثبت کاذب بدهد.

ویژگی های تشخیص سرمی

برای تشخیص سرولوژیکی سیفلیس در دوره های مختلف آناز رگ خون بگیرید توصیه می شود تجزیه و تحلیل با معده خالی انجام شود، این تعداد نتایج مثبت کاذب را کاهش می دهد. لوله باید استریل باشد. هنگام انجام آزمایشات سریع، در برخی موارد، خون از انگشت گرفته می شود.

در صورت مشکوک شدن، مایع مغزی نخاعی برای تشخیص سرمی مصرف می شود. برای تجزیه و تحلیل آن، از همان روش هایی که در مطالعه خون استفاده می شود، استفاده می شود.

برای تشخیص سیفلیس، معاینه کامل را در کلینیک ما انجام دهید.